組蛋白去乙?；?對帕金森病細胞模型中α-突觸核蛋白的影響及可能機制.pdf

1、背景:α-突觸核蛋白異常聚集在帕金森?。≒arkinson's disease，PD）發(fā)病中扮演重要角色，探討影響α-突觸核蛋白的核心因子對于探索PD新型治療方法具有重要意義。已有研究顯示在多種神經(jīng)變性疾病模型中，組蛋白去乙酰化酶6（Histone deacetylase6，HDAC6）可通過多條途徑促進異常蛋白質(zhì)的降解；但另有研究顯示 HDAC6在部分神經(jīng)系統(tǒng)疾病中與誘發(fā)線粒體凋亡通路有關(guān)。而關(guān)于HDAC6在PD發(fā)病中的確切作用及其機

2、制，目前尚不明確。
　　目的:構(gòu)建PD細胞模型，研究調(diào)節(jié)HDAC6水平對α-突觸核蛋白異常聚集的影響及其可能機制。
　　方法:將野生型pcDNA3.1（+）-α-突觸核蛋白真核表達質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)入S K-N-S H細胞，并加入蛋白酶體抑制劑lac tacys tin，制成蛋白質(zhì)異常聚集的 PD模型；通過 siRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)干擾 HDAC6表達或p EG FP-HDAC6轉(zhuǎn)染使其過表達后，使用噻唑藍比色法檢測細胞存活率，蛋白免疫印

3、跡法檢測α-突觸核蛋白寡聚體、熱休克蛋白（Heat shock protein，HSP）27和HSP70的表達，使用免疫熒光染色檢測包涵體水平。
　　結(jié)果: PD模型組較對照組細胞存活率下降、α-突觸核蛋白寡聚體水平升高、出現(xiàn)包涵體、HSP27和 HSP70表達水平升高；預(yù)先干擾HDAC6表達的PD模型細胞存活率進一步下降、寡聚體水平進一步升高、包涵體數(shù)量減少、HSP27和HS P70表達水平降低；而預(yù)先使HDAC6過表達的 PD