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文檔簡介
1、目的:研究組蛋白去乙?;敢种苿┪鬟_本胺對胃癌細胞株SGC-7901的體外抗增殖作用及相關的作用機制。
方法:應用MTT法檢測西達本胺對SGC-7901細胞的增殖抑制率;采用Annexin V/PI雙染流式細胞術分析SGC-7901細胞凋亡比例;逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(reversetranscription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測沉默信息調(diào)節(jié)因子2相關酶1(silentmatin
2、g type information regulator2 homolog1,SIRT1)、組蛋白去乙?;?1(histonedeacetylase11,HDAC11)mRNA的表達情況,實時熒光定量-聚合酶鏈反應(Real-timequantitative-polymerase chain reaction,RT-qPCR)檢測表皮生長因子受體(epithelial growthfactor receptor,EGFR)mRNA的表
3、達情況,并用全自動DNA測序儀對EGFR基因進行測序;蛋白免疫印跡法(Western Blot)檢測Notch1蛋白的表達情況。所有實驗均重復3次,結果以均數(shù)±標準差(x±s)表示,P<0.05被認為有統(tǒng)計學意義。
結果:在16-256μmol/L濃度范圍內(nèi),西達本胺可劑量依賴性地抑制SGC-7901細胞增殖(P<0.05),24h、48h、72h的IC50分別為(168.11±16.02)μmol/L、(121.46±9.3
4、3)μmol/L、(66.59±5.62)μmol/L。經(jīng)32、64、128μmol/L西達本胺作用48h后,細胞凋亡率分別為(31.98±0.79)%、(73.94±1.92)%、(89.60±0.82)%,明顯高于對照組(9.02±1.18)%(P<0.05);而SIRT1、HDAC11、EGFR mRNA表達降低(P<0.05);Notch1蛋白表達亦降低(P<0.05)。
結論:西達本胺可抑制SGC-7901細胞增殖,
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