不同EGFR基因突變檢測方法在選擇性非小細胞肺癌石蠟標本檢測中的探索.pdf

1、研究背景:每年全世界肺癌新發(fā)病例大約1,200,000,其中80％以上為非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),而且大多數(shù)診斷時已是晚期,雖經(jīng)目前的標準方案治療,其預(yù)后仍然不佳。表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一種酪氨酸激酶,與腫瘤的發(fā)生、生長及轉(zhuǎn)移有關(guān),常常在NSCLC中過表達。因此,EGFR是腫瘤治療最有前景的治療靶點之一。EG

2、FR基因突變與小分子酪氨酸激酶抑制劑(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)吉非替尼和厄洛替尼的臨床反應(yīng)有關(guān),而且在亞裔、女性、非吸煙、腺癌患者中EGFR突變率高,因此EGFR基因突變是非小細胞肺癌患者EGFR-TKI靶向治療有效的強的預(yù)測因子。目前使用的檢測EGFR基因突變的方法往往受腫瘤標本限制很難適用于每一個病人,特別是晚期肺癌患者,因此靈敏、方便快捷、經(jīng)濟的檢測方法正是臨床所迫切需要的。
　　目的

3、:通過比較熒光定量特異引物雙擴增系統(tǒng)(又稱ADx-ARMS)和直接測序法在檢測45例選擇性NSCLC手術(shù)或活檢標本EGFR基因突變的局限,探討ADx-ARMS法用于臨床常規(guī)檢測NSCLC標本EGFR基因突變的可行性。
　　方法:選取安徽省立醫(yī)院胸外科非吸煙或少量吸煙的45例手術(shù)的NSCLC患者,將福爾馬林固定石蠟包埋的手術(shù)標本用顯微切割技術(shù)獲取腫瘤組織細胞,采用QIAamp DNA提取試劑盒提取基因組DNA,通過ADx-ARMS及

4、DNA直接測序技術(shù)分析NSCLC患者中EGFR基因突變情況。
　　結(jié)果:45例NSCLC中,ADx-ARMS檢測有29例存在EGFR基因突變,突變檢出率為64.4%,其中22例為外顯子19的缺失突變,6例為外顯子21點突變,1例為外顯子19和21的共同突變。直接測序檢測出12例EGFR基因突變,突變檢出率為26.7%,其中9例為外顯子19的缺失突變,3例為外顯子21點突變,與ADx-ARMS檢測結(jié)果一致。非鱗癌EGFR基因突變率8

5、4.8%(28/33)顯著高于鱗癌患者8.3%(1/12);女性患者的突變率為83.3%(20/24)高于男性患者42.9%(9/21);兩者之間的差異均具統(tǒng)計學(xué)意義(P值分別為P=0.000,P=0.005)。
　　結(jié)論:在單中心選擇性NSCLC手術(shù)標本中ADx-ARMS法及直接測序法均能檢測出EGFR基因的突變。該中心EGFR突變以外顯子19的缺失突變和外顯子21的點突變?yōu)橹?在非鱗癌和女性中EGFR基因突變發(fā)生顯著。相比直接