同種異體肝細(xì)胞腹腔內(nèi)移植聯(lián)合ALR治療大鼠急性肝衰竭的研究.pdf

1、目的：急性肝衰竭(ALF)起病急，自然死亡率高，目前最有效的治療是原位肝臟移植，但由于供肝短缺，等待肝移植的患者越來越多，許多患者在等待移植期間死亡，這促進(jìn)了廣大學(xué)者探索治療ALF新的方法。而肝細(xì)胞移植(HCT)被公認(rèn)為繼肝移植后一項(xiàng)有效、安全而有希望的治療方法，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明脾實(shí)質(zhì)內(nèi)移植為最有效的移植途徑，但臨床脾內(nèi)移植手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)大，在臨床應(yīng)用中受到限制。本研究擬探討同種異體肝細(xì)胞腹腔內(nèi)移植聯(lián)合ALR治療大鼠ALF的療效，及ALR在同種異

2、體HCT免疫應(yīng)答中的作用及其機(jī)制。 方法：采用半原位膠原酶灌注法分離成年SD大鼠肝細(xì)胞用以移植。用1.0g/kg的D-gal誘導(dǎo)SD大鼠ALF，誘導(dǎo)后24h，74只ALF大鼠隨機(jī)分成5組，除Ⅴ組14只外，其余組各15只。Ⅰ組：注射生理鹽水；Ⅱ組：移植2×10<'7>肝細(xì)胞，以后注射生理鹽水；Ⅲ組：移植2×10<'7>肝細(xì)胞，聯(lián)合CsA10mg．kg<'-1>．d<'-1>；Ⅳ組：移植2×10<'7>肝細(xì)胞，同時(shí)注射ALR50μg

3、．kg<'-1>．d<'-1>；Ⅴ組：注射ALR50μg．kg<'-1>．d<'-1>；肝細(xì)胞和藥物均腹腔內(nèi)注射。觀察大鼠的存活率、肝臟功能、移植肝細(xì)胞存活情況、病理變化，檢測各組大鼠CD4、CD8、CD68、IL-1β、TNF-α的水平。 結(jié)果：各組間大鼠2周存活率兩兩比較，Ⅳ組存活率顯著高于Ⅰ組(66.7％vs 0％，P=0.001)，余組間無差異。藥物誘導(dǎo)后2-3天血清生化指標(biāo)水平達(dá)高峰，各組間無差異。但d1-2腹水生化指

4、標(biāo)有差異，Ⅲ組ALT水平高于Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ組；Ⅱ、Ⅲ組AST水平均高于Ⅳ、Ⅴ組，Ⅰ組高于Ⅳ組；Ⅰ組TBil低于Ⅱ、Ⅳ組。移植后第14天生化指標(biāo)恢復(fù)正常。移植后d1-2血清TNF-α水平Ⅰ、Ⅱ組均高于Ⅳ組、Ⅴ組，Ⅲ組高于Ⅴ組；Ⅳ組d1-2血清IL-1β低于Ⅱ組；d1-2腹水TNF-α、IL-1βⅡ組均高于其它組。d1-2大網(wǎng)膜CD68陽性率Ⅱ組高于Ⅰ、Ⅳ組；肝細(xì)胞結(jié)節(jié)內(nèi)CD68陽性率Ⅳ組低于Ⅱ、Ⅲ組。移植后大網(wǎng)膜d1-2 CD4、CD8陽性率