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文檔簡介
1、第一部分同種異體大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞移植治療下肢慢性缺血的實驗研究 目的:研究同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞在后肢缺血大鼠缺血肌肉組織內(nèi)存活、遷移、分化情況。評價同種異體骨髓問充質(zhì)干細胞移植的治療性血管生成作用及治療下肢慢性缺血的效果。 方法:分離、純化、擴增培養(yǎng)雄性wistar大鼠的MSCs,并用Brdu標記。20只Wistar大鼠,體重200-250g。經(jīng)左股總動脈切斷后制成后肢缺血模型再隨機分成2組:A缺血對照組,BMS
2、Cs移植組:大鼠股動脈切斷后7天接受同種異體MSCs移植治療(5×106MSCs/100μl,分6點注入大腿缺血的肌肉)。治療3周后分別對缺血對照組、MSCs移植組進行了血管造影、皮溫測定、新生血管內(nèi)皮細胞數(shù)及毛細血管密度的測定。 結(jié)果:同種異體大鼠的骨髓間充質(zhì)干細胞可在后肢缺血大鼠缺血肌肉組織內(nèi)存活、遷移、分化為血管內(nèi)皮細胞形成新生血管;血管造影發(fā)現(xiàn)MSCs移植組治療后側(cè)枝循環(huán)明顯增加。下肢皮溫測定發(fā)現(xiàn)缺血的左下肢同正常的右下
3、肢之間的溫差,治療組均較缺血對照組顯著降低,(2.66±O.17vs1.04±0.23,P 4、有治療性血管生成作用。 第二部分低頻閾下電刺激對缺血后肢VEGF和Angio-l表達的影響 目的:研究電刺激對后肢缺血大鼠VEGF及Anglo一1表達的調(diào)節(jié)作用。評價電刺激的治療性血管生成作用及治療下肢慢性缺血的效果。 方法:20只Wistar大鼠,體重200—250g。經(jīng)左股總動脈切斷后制成后肢缺血模型再隨機分成2組:A缺血對照組,B電刺激組:大鼠股動脈切斷后7天,于大腿缺血的肌肉插入帶有針灸針的電極,強度O. 5、h,頻率30Hz(低于肌肉收縮強度),每天2小時持續(xù)3周。治療3周后用免疫組化方法檢測電刺激對于后肢缺血大鼠VEGF及Angio-1表達的影響,再分別對缺血對照組、電刺激組進行了新生血管內(nèi)皮細胞數(shù)及毛細血管密度的測定。 結(jié)果:后肢缺血大鼠經(jīng)電刺激后VEGF及Anglo-1的表達均較非電刺激組明顯增加(0.48±0.06vs0.28±O.07,P<0.05),(0.58±0.03vs0.3±0.05,P<0.05),鏡下每高倍視野 6、中新生血管內(nèi)皮細胞及毛細血管密度計數(shù)治療組均較非電刺激組增加。(36.7±5.4vs18.5±2.3,P 7、聯(lián)合電刺激對慢性下肢缺血的治療性血管生成作用研究 目的:評價同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞移植聯(lián)合電刺激的治療性血管生成作用及治療下肢慢性缺血的效果。 方法:分離、純化、擴增培養(yǎng)雄性wistar大鼠的MSCs,并用Brdu標記。40只Wistar大鼠,體重200-250g。經(jīng)左股總動脈切斷后制成后肢缺血模型再隨機分成4組:A缺血對照組,BMSCs移植組:大鼠股動脈切斷后7天接受同種異體MSCs移植治療(5×106MSCs/l0 8、0u1,分6點注入大腿缺血的肌肉),C電刺激組:大鼠股動脈切斷后7天,于大腿缺血的肌肉插入帶有針灸針的電極,強度0.h,頻率30Hz(低于肌肉收縮強度),每天2小時持續(xù)3周,DMSCs移植+電刺激組。治療3周后分別對缺血對照組、電刺激組、MSCs移植組、MSCs移植+電刺激組進行了血管造影、皮溫測定、新生血管內(nèi)皮細胞數(shù)及毛細血管密度的測定。 結(jié)果:血管造影發(fā)現(xiàn)MSCs移植聯(lián)合電刺激組治療后側(cè)枝循環(huán)明顯增加。下肢皮溫測定發(fā)現(xiàn)缺血的
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