張氏肝細(xì)胞Chang liver cell移植改善急性肝衰竭的預(yù)后.pdf

1、【目的】：Changliver細(xì)胞是一種肝腫瘤細(xì)胞系,其是否可用于生物人工肝支持系統(tǒng)尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究通過(guò)體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其肝細(xì)胞功能,旨在尋找一種新的細(xì)胞源。
　　【方法】：通過(guò)Western-Blotting和激光共聚焦檢測(cè)Changliver細(xì)胞的肝細(xì)胞特異性蛋白表達(dá)情況,在體外評(píng)估其肝細(xì)胞功能。采用RT-PCR從基因水平檢測(cè)肝細(xì)胞功能相關(guān)基因的表達(dá)情況。采用SD大鼠90％肝切除術(shù)誘導(dǎo)急性肝衰竭(ALF)模型。取生長(zhǎng)良好的Ch

2、angLiver細(xì)胞移植入大鼠脾臟內(nèi),并于移植后24小時(shí)行90%肝切除術(shù)誘導(dǎo)急性肝衰竭,每隔24小時(shí)采血一次,測(cè)定其肝功能指標(biāo)變化情況。并統(tǒng)計(jì)生存率。
　　【結(jié)果】：在體外,Western-Blotting和激光共聚焦清晰的顯示了ChangLiver細(xì)胞表達(dá)肝細(xì)胞特異性標(biāo)志蛋白,如白蛋白(ALB)、葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶(UGT)及細(xì)胞色素酶P450(CYP3A4)。RT-PCR同樣可檢測(cè)到相關(guān)基因在mRNA水平的表達(dá)。在體內(nèi),實(shí)驗(yàn)組接

3、受ChangLiver細(xì)胞移植,其長(zhǎng)期生存率達(dá)到40%,而對(duì)照組的長(zhǎng)期生存率為0(P<0.01)。移植ChangLiver細(xì)胞的大鼠肝功能在急性肝衰竭后24小時(shí)較對(duì)照組獲得明顯的改善,表現(xiàn)為血樣標(biāo)本中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST),膽紅素和堿性磷酸酶(ALP)等指標(biāo)的下降(ALT,619.33±85.64vs.1798±424.06μ/l,G2vs.G1;AST,1732.83±162.37vs.3033.25±506.73