異種去細(xì)胞真皮基質(zhì)防止氣管瘢痕狹窄的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、喉氣管狹窄是臨床上較為常見(jiàn)的疾病,狹窄導(dǎo)致通氣障礙、呼吸困難、患者需行氣管切開(kāi)、嚴(yán)重影響患者的社會(huì)交往及生存質(zhì)量,給患者帶來(lái)極大的身心痛苦。氣管粘膜受損、壞死、缺損是造成氣管狹窄的主要原因之一。因此,氣管粘膜缺損及時(shí)有效的修復(fù)是預(yù)防及治療氣管狹窄的重要手段。目前,氣管粘膜缺損的主要修復(fù)方法有鼻中隔粘膜、鼻竇粘膜、口腔粘膜等自體皮片的移植和轉(zhuǎn)粘膜瓣等。但是,自體皮片或粘膜瓣存在來(lái)源有限、取材時(shí)增加患者痛苦等問(wèn)題。隨著組織生物工程的發(fā)展,異

2、種去細(xì)胞真皮基質(zhì)作為一種生物修復(fù)材料,來(lái)源廣泛、使用簡(jiǎn)便,已成功應(yīng)用于口腔黏膜修復(fù)、聲帶重建、腹壁修補(bǔ)等領(lǐng)域[1-3]。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用ADM對(duì)氣管粘膜大面積缺損的實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行修補(bǔ),觀察實(shí)驗(yàn)犬氣管粘膜生長(zhǎng)修復(fù)情況,希望能為臨床上氣管粘膜大面積損傷患者提供一種新的有效的修復(fù)方法。
　　目的:
　　1.通過(guò)王智的建模方法[4],切開(kāi)第2到第6氣管環(huán),完整剝離20mm×25mm的氣管前壁粘膜,驗(yàn)證20mm×25mm的氣管粘膜缺損可以引起實(shí)

3、驗(yàn)犬的氣管狹窄。
　　2.通過(guò)使用ADM修復(fù)氣管粘膜缺損,明確ADM是否可以誘導(dǎo)氣管粘膜的修復(fù),是否可以防止氣管瘢痕性狹窄的形成,為下一步臨床上修復(fù)大面積氣管粘膜損傷、防止氣管瘢痕狹窄形成提供理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法:
　　1.建立犬氣管粘膜缺損模型
　　本實(shí)驗(yàn)通過(guò)王智的建模方法,用10只犬于氣管前壁正中線偏右15mm處縱行切開(kāi)第2至第6氣管環(huán),在距離氣管切口8mm外完整剝離面積為20mm×25mm的氣管前壁全

4、層粘膜,底部的氣管軟骨膜保留完整,制造20mm×25mm氣管全層粘膜缺損動(dòng)物模型。
　　2.ADM在防止氣管瘢痕狹窄中的作用
　　將10只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為2組:實(shí)驗(yàn)組(5只)將20mm×25mm的脫細(xì)胞真皮基質(zhì)材料覆蓋縫合于20mm×25mm的創(chuàng)面上;對(duì)照組(5只)將20mm×25mm的創(chuàng)面做曠置處理。分別于術(shù)后2、4、6、8、10周定期進(jìn)行一般觀察、喉鏡觀察、大體觀察、最大瘢痕厚度觀察、HE染色觀察、Masson染色觀察及

5、電鏡觀察。
　　結(jié)果:
　　1.建立犬氣管粘膜缺損模型
　　10只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均能良好的耐受建模的手術(shù)操作。5只對(duì)照組動(dòng)物隨著時(shí)間延長(zhǎng)組織學(xué)檢查和電鏡檢查可觀察到不同程度的疤痕修復(fù),8周時(shí)喉鏡可觀察到氣管明顯畸形。
　　2.ADM在防止氣管瘢痕狹窄中的作用
　　所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均存活至預(yù)期時(shí)間終點(diǎn)。HE結(jié)果發(fā)現(xiàn)采用異種去細(xì)胞真皮基質(zhì)修復(fù)創(chuàng)面的實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物,2周時(shí)基質(zhì)真皮內(nèi)已有細(xì)胞長(zhǎng)入,4周時(shí)基質(zhì)表面已有排列整齊的柱狀

6、上皮細(xì)胞覆蓋。Masson染色發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組4周時(shí)已有紅染血管壁結(jié)構(gòu)。電鏡也觀察到實(shí)驗(yàn)組4周時(shí)創(chuàng)面表面有纖毛覆蓋。喉鏡觀察實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物在10周時(shí)管腔形態(tài)和大小均無(wú)明顯變化。
　　結(jié)論:
　　1.實(shí)驗(yàn)證明20mm×25mm的氣管前壁粘膜全層切除可以引起犬的氣管瘢痕狹窄。
　　2.利用ADM對(duì)氣管粘膜缺損進(jìn)行修補(bǔ)后,ADM可以較好地誘導(dǎo)組織細(xì)胞的生長(zhǎng)修復(fù),抑制瘢痕生長(zhǎng),防止氣管瘢痕狹窄的形成。ADM來(lái)源廣泛,修補(bǔ)方法簡(jiǎn)便易行,為