應(yīng)用異種脫細(xì)胞真皮的眼瞼原位重建術(shù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 眼部整形手術(shù)需要多種修復(fù)材料，保存的異體鞏膜是最常應(yīng)用的材料之一，但同種異體鞏膜來源有限，費(fèi)用相對(duì)較高，沒有眼庫(kù)的醫(yī)院，人體鞏膜組織無(wú)從獲得。而且異體鞏膜移植有傳染疾病的危險(xiǎn)，因此眼科整形手術(shù)需要尋找更易的、更厚韌、更經(jīng)濟(jì)的理想材料。異種(豬)脫細(xì)胞真皮基質(zhì)(acellular xenogenic dermal matrix，Xeno-ADM)是異種豬皮經(jīng)特殊處理，去除其細(xì)胞成分后得到的一種真皮替代品。在異種(豬)脫細(xì)胞

2、真皮基質(zhì)的制作工藝中，去除表皮和細(xì)胞，去除組織抗原性，在真皮乳頭層表面，保留了完整、連續(xù)的基底膜和真皮中膠原束結(jié)構(gòu)，使其排列正常，彈力纖維正常存在。異種(豬)脫細(xì)胞真皮基質(zhì)是近年來整形領(lǐng)域的重點(diǎn)研究項(xiàng)目。本研究進(jìn)行異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)替代瞼板在兔眼瞼缺損模型中進(jìn)行眼瞼原位重建術(shù)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，從組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)水平研究獲得可行性依據(jù)以證明異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)可以作為瞼板替代物應(yīng)用于臨床，為異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)在眼部整形和外傷修復(fù)的推廣應(yīng)用提供依據(jù)。

3、 方法： 36只新西蘭大白兔隨機(jī)分為兩組，制作兔眼瞼缺損動(dòng)物模型，隨機(jī)分別給予異種脫細(xì)胞真皮、兔鞏膜(異體鞏膜)行眼瞼原位重建術(shù)?；铙w觀察動(dòng)物術(shù)后情況和移植物情況，于術(shù)后1、2、4、6、8和12周，取帶植片(異種脫細(xì)胞真皮和異體鞏膜)的眼瞼，光鏡下觀察替代材料和自體瞼板交界處的組織病理學(xué)改變，包括炎癥反應(yīng)、纖維血管化情況和融合情況。并取4、8和12周標(biāo)本做透射電鏡觀察上述組織的超微結(jié)構(gòu)改變。 結(jié)果： 1．

4、異種脫細(xì)胞真皮與異體鞏膜作為瞼板替代物進(jìn)行眼瞼原位重建術(shù)后，大體觀察二者反應(yīng)類似，Xeno-ADM較異體鞏膜炎癥反應(yīng)小，術(shù)后炎癥反應(yīng)消退較快，術(shù)后未見植入物暴露、脫落和感染現(xiàn)象，肉眼見血運(yùn)良好無(wú)壞死，受體結(jié)膜可在植入體(豬脫細(xì)胞真皮或兔異體鞏膜)表面爬行生長(zhǎng)。 2．光鏡下觀察Xeno-ADM在2周時(shí)移植物與兔自身瞼板膠原組織的分界已不十分明顯，并開始出現(xiàn)成纖維細(xì)胞和少量毛細(xì)血管。8周時(shí)移植物內(nèi)可見增生的小血管和神經(jīng)纖維團(tuán)，交界不

5、清逐漸過渡， 12周時(shí)不能區(qū)分移植物和原組織膠原成分，脫細(xì)胞真皮自身的膠原纖維排列失去方向性，其間可見增生的小血管和神經(jīng)纖維小管。異體鞏膜組4周時(shí)才見新生血管和成纖維細(xì)胞，6周時(shí)仍可見少量淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤(rùn)。兩組比較，Xeno-ADM在1、2、4、6、8w較異體鞏膜組炎癥反應(yīng)消退快，血管化快，新生膠原長(zhǎng)入快。12周時(shí)鏡下表現(xiàn)基本類似，無(wú)顯著差異。 3．電鏡下兩組變化類似，4周時(shí)自體瞼板與植入體已無(wú)明顯界限，膠原纖維結(jié)構(gòu)清晰，周

6、期性橫紋明顯，纖維間可見到新生的毛細(xì)血管、神經(jīng)及正在吞噬成纖維細(xì)胞的巨噬細(xì)胞。8周時(shí)可見到大量功能活躍的成纖維細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有豐富的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及多聚核糖體，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈池樣擴(kuò)張，擴(kuò)張的池內(nèi)含有蛋白樣物質(zhì)，成纖維細(xì)胞周罔有許多均質(zhì)的蛋白樣物質(zhì)。12周時(shí)自體瞼板與植入體無(wú)明顯界限，膠原纖維排列不整，橫縱交錯(cuò)，其間可見到凋亡細(xì)胞、凋亡小體和神經(jīng)纖維。膠原原纖維周期性橫紋整齊，結(jié)構(gòu)清晰。 結(jié)論： 1．異種脫細(xì)胞真皮與異體鞏膜作為

7、瞼板替代物，兩者人體觀察無(wú)顯著差異，組織病理學(xué)變化和免疫反應(yīng)相似。從形態(tài)學(xué)上大致分為三個(gè)階段：炎癥反應(yīng)階段(植入后1-2周)、細(xì)胞浸潤(rùn)及纖維血管長(zhǎng)入階段(植入后2周-2月)、瘢痕組織形成階段(植入后2-3月)。 2．Xeno-ADM在眼瞼重建代替瞼板手術(shù)中，較異體鞏膜炎癥反應(yīng)小而且術(shù)后炎癥反應(yīng)消退快，未見植入物暴露、脫落和感染現(xiàn)象，血運(yùn)良好無(wú)壞死，受體結(jié)膜可在脫細(xì)胞真皮表面爬行生長(zhǎng)。 3．Xeno-ADM作為瞼板修補(bǔ)材料