PMS肝氣逆證大鼠腦區(qū)ERα和ERβ基因表達(dá)及藥物的影響.pdf

1、目的:制備經(jīng)前期綜合征(premenstrual syndrome, PMS)肝氣逆證大鼠模型;檢測(cè)大鼠中樞不同腦區(qū)(下丘腦、邊緣葉、額葉皮層和海馬)ERα和ERβ基因表達(dá)的變化和ERβ/ERα與經(jīng)前期綜合征(PMS)肝氣逆及行為學(xué)變化的關(guān)系;探討PMS肝氣逆證發(fā)病的微觀機(jī)制及中藥復(fù)方制劑經(jīng)前平顆粒的干預(yù)作用。方法:采用電籠刺激法制備PMS肝氣逆證大鼠模型,以調(diào)肝方藥經(jīng)前平顆粒進(jìn)行藥物干預(yù)。采用細(xì)胞涂片法觀察大鼠陰道細(xì)胞形態(tài),確定動(dòng)情周

2、期:接收期與非接收期。曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠行為學(xué)變化。提取腦組織RNA和蛋白質(zhì),采用半定量RT-PCR法測(cè)定各ERα和ERβmRNA水平變化,采用蛋白質(zhì)印跡技術(shù)(western blot, WB)法檢測(cè)各腦區(qū)ERα與ERβ蛋白質(zhì)水平變化。結(jié)果:與正常對(duì)照組大鼠相比,模型組大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的水平得分、垂直得分及總分均顯著減少;與模型組相比,給藥組大鼠曠場(chǎng)水平得分、垂直得分及總分均顯著增加。利用RT-PCR方法研究顯示,與正常對(duì)照組大鼠相比,模型組

3、大鼠下丘腦、邊緣葉、皮層和海馬組織ERα和ERβmRNA表達(dá)顯著降低(P＜0.05),調(diào)肝方藥經(jīng)前平顆粒干預(yù)可改變ERα和ERβmRNA表達(dá)水平降低的狀態(tài)。蛋白印跡實(shí)驗(yàn)表明,與正常對(duì)照組大鼠相比,模型組大鼠額葉皮層、海馬、下丘腦、邊緣葉ERα和ERβ表達(dá)顯著降低(P＜0.01);與模型組比較,給藥組各腦區(qū)的ERα和ERβ表達(dá)水平不同程度的升高。結(jié)論:PMS肝氣逆證模型大鼠四個(gè)腦區(qū)ERα和ERβ基因表達(dá)降低,提示PMS肝氣逆證的發(fā)生可能與