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文檔簡介
1、目的:結(jié)直腸腫瘤是我國最常見的惡性腫瘤之一,發(fā)病率僅次于肺癌、胃癌和肝癌。隨著飲食結(jié)構(gòu)和生活環(huán)境的變化,我國結(jié)直腸癌的發(fā)病率從60年代的0.06‰,猛增到90年代的0.24‰?,F(xiàn)代科學技術(shù)的進步,不斷有新的診斷和治療手段出現(xiàn),但是,結(jié)直腸癌的預(yù)后不容樂觀,仍有較高復(fù)發(fā)率。隨著對腫瘤基因水平的研究,目前認為結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展可能始于正?;虻膿p傷、癌基因的激活或者抑癌基因的失活。其中,真核生物鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子Krüppel-likefac
2、tor4(KLF4),通過激活或者抑制目的基因的轉(zhuǎn)錄來調(diào)控基因表達的時間特異性和組織特異性,在細胞生長、分化及凋亡等過程中發(fā)揮重要作用。本文主要探討了KLF4在結(jié)直腸腫瘤中表達的變化,并分析其表達變化與臨床參數(shù)間的關(guān)系。 方法:1.應(yīng)用組織微陣列結(jié)合免疫組織化學S-P法,檢測77例結(jié)直腸癌組織,40例癌旁組織和7例腺瘤組織中KLF4的表達及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。判斷標準:由兩位有經(jīng)驗的病理專家對結(jié)果進行評定。KLF4蛋白在石蠟
3、切片中陽性表達主要定位于細胞質(zhì),呈棕黃色顆粒。根據(jù)腫瘤細胞顯色的比例及染色強度,對KLF4表達做半定量判定。按陽性細胞率評分:陽性細胞數(shù)占11%~50%為2分;51%~80%為3分;>80%為4分。按顯色程度評分:染色弱為1分;中等染色為2分;強染色為3分。將兩種評分結(jié)合起來分4級:無論染色強度如何,細胞陽性率≤l0%為陰性(-);評2或3分為弱陽性(+);評4~7分為強陽性(++~+++)。2.采用手術(shù)切除結(jié)直腸良惡性腫瘤組織,以距腫
4、瘤10cm以上的正常黏膜作為對照,通過WesternBlot方法,以β-actin為內(nèi)對照,檢測KLF4在新鮮結(jié)直腸腫瘤組織與正常黏膜組織中的表達,實驗結(jié)果用Image-proplusVersion5.0.1圖像分析系統(tǒng)進行灰度值測定。3.采用SPSS10.0統(tǒng)計分析軟件進行分析,對KLF4的表達與臨床病理因素的關(guān)系采用x2檢驗,P<0.05為有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果:1.免疫組織化學:(1)在77例結(jié)直腸癌組織中KLF4的陽性表達
5、率為76.62%(59/77),癌旁形態(tài)學正常的結(jié)直腸黏膜可見KLF4高表達;強陽性率在正常黏膜、腺瘤、高分化、中分化癌中分別為57.5%、57.14%、37.5%、21.4%,低分化癌無強陽性表達,其表達率與腫瘤分化程度顯著相關(guān)(P<0.01)。(2)KLF4表達與患者性別、年齡、腫瘤位置、浸潤深度、是否轉(zhuǎn)移、大體類型以及臨床Dukes分期無顯著相關(guān)(P>0.05)。2.蛋白印跡:Image-proplusVersion5.0.1圖像
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