利用膠束毛細(xì)管電泳對茶葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥分離檢測的研究.pdf

1、從2006年起歐盟降低了進(jìn)口茶葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的最低標(biāo)準(zhǔn)，使茶葉中農(nóng)藥痕量殘留的問題成為出口貿(mào)易中的一項(xiàng)障礙。目前廣泛應(yīng)用的GC-ECD檢測方法存在一些問題：(1)有些農(nóng)藥不耐高溫，而有些則沸點(diǎn)較高，不利于同時(shí)檢測；(2)ECD檢測器作為質(zhì)量檢測器，檢測結(jié)果較易受到干擾，對樣品的前處理要求較高；難以滿足痕量擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留快速高效檢測的需求。而高效液相色譜(HPLC)檢測需要消耗大量的有機(jī)溶劑，對于痕量物質(zhì)的檢測柱效不高，且

2、有時(shí)不同類型的檢測物質(zhì)需要不同HPIC柱，不能滿足分析檢測機(jī)構(gòu)經(jīng)常變化檢測物質(zhì)的需要。因此需要開發(fā)出一種能夠開發(fā)出一種快速的色譜分離方法，既不需要十分嚴(yán)格的前處理，又可以對多類物質(zhì)進(jìn)行分離和分析。 由于七種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥在溶液中均顯電中性，因此決定使用高效毛細(xì)管電泳中的膠束毛細(xì)管電泳作為分離分析方法。為了使七種待測物質(zhì)能夠分離，根據(jù)線性自由能模型向背景緩沖溶液中添加了兩種有機(jī)改性劑——乙腈和異丙醇來調(diào)節(jié)膠束的選擇性。通過調(diào)節(jié)三

3、(羥甲基)氨基甲烷(tris)和SDS的濃度、pH值和有機(jī)改性劑的添加量幾個(gè)參數(shù)，使七種待測物質(zhì)得到了分離，在最佳分離條件下，即緩沖溶液：30raM SDS、25mM tris、15％(V/V)異丙醇和20％(V/V)乙腈，pH8.2，分離電壓23kV，毛細(xì)管溫度25℃。出峰順序依次為：功夫菊酯、聯(lián)苯菊酯、百樹菊酯、高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、二氯菊酯、氰戊菊酯。通過對七種擬除蟲菊酯分子結(jié)構(gòu)的分析，以及與緩沖溶液中的有機(jī)溶劑形成氫鍵的強(qiáng)弱關(guān)

4、系，推斷了出的峰順序與實(shí)際分析過程的出峰順序基本上符合在對實(shí)際的茶葉樣品中進(jìn)行前處理時(shí)選用了目前比較常用的SPE固相萃取法，通過穿漏試驗(yàn)，選擇洗脫溶劑以及建立淋洗曲線，獲得了最佳的前處理?xiàng)l件：使用以佛羅里硅土作為填料的SPE柱，10ml容量的空柱中添加2g佛羅里硅土，最大上樣量是50ml，收集前6ml洗脫液進(jìn)行分析。七種物質(zhì)在前處理階段的回收率都達(dá)到75％以上。 毛細(xì)管電泳一般多是采用DAD或者是UV檢測器，由于毛細(xì)管的管徑較細(xì)

5、，導(dǎo)致檢測的檢測下限比較高，為了滿足歐盟的檢測標(biāo)準(zhǔn)，采用了柱上堆集技術(shù)——反向電壓堆集，對樣品進(jìn)行富集，通過參數(shù)優(yōu)化，得到最優(yōu)的柱上在線堆積濃縮操作為：以15％異丙醇、20％乙腈、60mM十二烷基硫酸鈉(SDS)和50mM tris的混合物為背景緩沖溶液(BGS)。茶葉的浸提液經(jīng)過固相萃取凈化吹干后，用1mMSDS溶解溶液殘?jiān)?。進(jìn)樣100s后施加反向電壓，進(jìn)行反向在線堆積，當(dāng)電流恢復(fù)至正常分離時(shí)的95％時(shí)改變電壓方向，進(jìn)行正常分離。經(jīng)過

6、在線堆積濃縮，7種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥痕量殘留堆積因子均高于17，在線富集階段的回收率在82％以上，檢測下限分別達(dá)到：功夫菊酯0.025mg/kg、聯(lián)苯菊酯0.025mg/kg、百樹菊酯0.025mg/kg、高效氯氰菊酯0.025mg/kg、溴氰菊酯0.2 mg/kg、二氯菊酯0.025mg/kg、氰戊菊酯0.025 mg/kg，滿足了2006年歐盟茶葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的最低標(biāo)準(zhǔn)。在分析自制的含有七種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥0.05mg/kg

7、的茶葉過程中，為了更真實(shí)的記錄樣品中菊酯類農(nóng)藥的濃度，對試驗(yàn)過程中可能引入得不確定因素進(jìn)行分析。七種擬出蟲菊酯類農(nóng)藥的測量值及不確定度如下：功夫菊酯0.048±0.0091mg/kg，聯(lián)苯菊酯0.411±0.0028mg/kg，百樹菊酯0.0476±0.0025mg/kg，高效氯氰菊酯0.0366±0.001 1g/kg，溴氰菊酯0.0758±0.0027mg/kg，二氯菊酯0.0386±0.0023mg/kg，氰戊菊酯0.0441±0