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文檔簡介
1、第三部分二甲雙胍對(duì)L6胰島素抵抗細(xì)胞SIRT3表達(dá)的影響及機(jī)制探討
目的:研究SIRT3在L6大鼠骨骼肌細(xì)胞胰島素抵抗中的作用,探討二甲雙胍改善骨骼肌胰島素抵抗可能的信號(hào)通路。
方法:建立棕櫚酸(PA)誘導(dǎo)的大鼠L6肌細(xì)胞胰島素抵抗模型,在L6正常細(xì)胞及L6胰島素抵抗細(xì)胞中過表達(dá)和干擾SIRT3基因??捡R斯亮藍(lán)染色觀察L6細(xì)胞出現(xiàn)肌管結(jié)構(gòu)情況,葡萄糖氧化酶-過氧化酶法檢測細(xì)胞上清中葡萄糖濃度,利用熒光探針DC
2、FH-DA檢測ROS水平。用Western blot檢測蛋白質(zhì)SIRT3、NF-κB、JNK1及SOD2表達(dá)水平的變化。
結(jié)果:與L6正常細(xì)胞相比L6胰島素抵抗細(xì)胞中葡萄糖吸收率降低,而ROS生成增多;過表達(dá)SIRT3后,L6細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收率升高,ROS生成減少,相反,干擾時(shí),L6細(xì)胞對(duì)葡萄糖的吸收率降低,ROS生成增多;二甲雙胍能使L6細(xì)胞SIRT3和SOD2表達(dá)增加,同時(shí)NF-κBP65和JNK1表達(dá)降低,葡萄糖吸
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