早期胰島素治療對(duì)2型糖尿病SD大鼠肝臟和骨骼肌NFκB炎癥通路及骨骼肌脂代謝的影響及機(jī)制研究.pdf

1、第一部分【研究背景和目的】早期胰島素治療可誘導(dǎo)部分初發(fā)2型糖尿病病人病情緩解，進(jìn)一步分析認(rèn)為病情緩解和胰島素抵抗改善密切相關(guān)。2型糖尿病是慢性炎癥性疾病，核因子κB(NFκB)活性增加及炎癥因子如腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)是導(dǎo)致胰島素抵抗的重要機(jī)制。因此，本研究旨在探討早期胰島素治療對(duì)2型糖尿病SD大鼠肝臟和骨骼肌細(xì)胞內(nèi)NFκB炎癥信號(hào)通路和炎癥因子表達(dá)的影響，研究后者是否參與早期胰島

2、素治療后肝臟和骨骼肌胰島素抵抗的改善。 【研究方法】建立高脂喂養(yǎng)聯(lián)合小劑量鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的2型糖尿病SD大鼠模型。糖尿病大鼠隨機(jī)分為早期和晚期治療組。早期治療在血糖升高后3天開(kāi)始，給予中效胰島素或格列奇特治療3周；晚期治療在血糖升高后4周開(kāi)始，給予中效胰島素治療3周。血糖控制目標(biāo)是隨機(jī)血糖<8mmol／1。檢測(cè)指標(biāo)如下： (1) 干預(yù)治療后腹腔糖耐量實(shí)驗(yàn)(IPGTT)，計(jì)算葡萄糖胰島素指數(shù)，評(píng)估機(jī)體胰島素抵抗的變化；

3、 (2)代謝指標(biāo)：體重、空腹血糖、HbAlc、胰島素、血總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肝臟和骨骼肌細(xì)胞內(nèi)甘油三酯水平； (3)肝臟糖異生關(guān)鍵酶磷酸烯酮丙酮酸羧激酶(PEPCK)蛋白表達(dá)水平，骨骼肌胰島素信號(hào)通路中葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子4(Glut4)基因和蛋白表達(dá)水平： (4)肝臟和骨骼肌內(nèi)IκBa、NFκB蛋白表達(dá)水平，NFκB P65 DNA結(jié)合活性； (5)肝臟和骨骼肌內(nèi)炎癥因子TNF-α、IL-6、IL-

4、1β基因表達(dá)。 【結(jié)論】早期胰島素治療可抑制2型糖尿病SD大鼠肝臟和骨骼肌內(nèi)活化的NFκB信號(hào)通路和炎癥因子，這些改變參與了肝臟和骨骼肌胰島素抵抗的改善。早期胰島素治療抑制炎癥反應(yīng)的機(jī)制和早期代謝控制改善糖脂毒性有關(guān)，我們研究進(jìn)一步證實(shí)炎癥反應(yīng)在代謝記憶中的作用以及早期代謝控制的重要作用?！　〉诙糠帧　　狙芯勘尘昂湍康摹垦芯勘砻骷〖?xì)胞內(nèi)甘油三酯(IMTG)沉積可導(dǎo)致骨骼肌胰島素抵抗，而后者是促進(jìn)機(jī)體胰島素抵抗的主要機(jī)制之一

5、。 本論文第一部分研究發(fā)現(xiàn)，早期胰島素治療使骨骼肌胰島素抵抗得到改善，肌細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量降低。促進(jìn)骨骼肌細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的機(jī)制有脂肪酸攝取增加、或／和脂質(zhì)合成增加、或／和脂質(zhì)氧化降低的作用；而目前對(duì)于胰島素治療后IMTG含量降低的機(jī)制并不清楚。因此，第二部分研究目的旨在進(jìn)一步探討早期干預(yù)治療促使IMTG降低的原因和分子機(jī)制。 【研究方法】本研究采用高脂喂養(yǎng)聯(lián)合小劑量鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的2型糖尿病SD大鼠模型。早期治療在血糖升

6、高后3天開(kāi)始，分別給予中效胰島素或格列奇特治療3周。血糖控制目標(biāo)是隨機(jī)血糖<8mmol／1。檢測(cè)指標(biāo)如下： (1)脂肪酸水解的關(guān)鍵酶脂蛋白脂酶(LPL)蛋白表達(dá)水平； (2)脂肪酸攝取的主要蛋白脂肪酸轉(zhuǎn)位酶(FAT／CD36)和脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(FATPl)蛋白表達(dá)水平； (3)控制脂肪酸合成的轉(zhuǎn)錄因子膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1 c(SREBP-1c)基因和核內(nèi)成熟型蛋白表達(dá)水平； (4)脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)線粒體