通心絡(luò)聯(lián)合津力達(dá)對糖尿病大鼠的腎臟保護(hù)作用及其對Akt-mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響.pdf

1、目的:
　　 采用高糖高脂喂養(yǎng)加小劑量STZ尾靜脈注射的方式將SD大鼠誘導(dǎo)為DM模型，觀察通心絡(luò)聯(lián)合津力達(dá)對DN的防治作用，并探討其相關(guān)作用機制，為“從絡(luò)論治DN”理論在臨床中的應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
　　 方法:
　　 SPF級雄性SD大鼠80只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，按體重隨機分為正常組(N)10只，模型組(M)、厄貝沙坦組(I)、通心絡(luò)組(T)、津力達(dá)組(J)和通心絡(luò)加津力達(dá)組(TJ)各14只。實驗期間，正常組大鼠

2、給予普通飼料和自來水，其余各組給予高糖高脂飼料。4周后，除正常組外，各組大鼠按35mg/kg的劑量尾靜脈注射STZ，72小時后尾靜脈采血測定空腹血糖，以≥11.1mmol/L為DM造模成功。所有藥品溶于5‰的CMC溶液中保持顆?；鞈揖鶆颍琈組給予CMC10ml·kg-1·d-1，I組給予厄貝沙坦25mg·kg-1·d-1，T組給予通心絡(luò)0.8g·kg-1·d-1，J組給予津力達(dá)1.5g·kg-1·d-1，TJ組給予(通心絡(luò)0.8g+津力

3、達(dá)1.5g)·kg-1·d-1，給藥干預(yù)共12周。給藥第12周末，收集大鼠尿液測尿微量白蛋白;禁食12h后，10％水合氯醛麻醉，腹主動脈取血，離心留取血清，用于測定各項生化指標(biāo);取左腎稱重后，分別保存于4％甲醛、2.5％戊二醛中，用于光鏡、電鏡和免疫組化指標(biāo)的檢測;右腎保存于液氮中，觀察Akt/mTOR信號通路中Akt與mTOR等蛋白的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:
　　 1.一般情況
　　 與正常大鼠相比，DM大鼠表

4、現(xiàn)為明顯的多飲、多食、多尿及形體消瘦。正常組因灌胃死亡1只，模型組與通心絡(luò)加津力達(dá)組各死亡7只，厄貝沙坦組、通心絡(luò)組與津力達(dá)組各死亡6只。
　　 2.體重、左腎重及相對腎重的比較
　　 模型組大鼠體重比正常組減輕，而左腎重、相對腎重均比正常組增大;各給藥組大鼠體重均比模型組增大，相對腎重則減小，差異均有高度統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 3.各項生化指標(biāo)的比較
　　 模型組大鼠的血糖、血脂及腎功能等各

5、項生化指標(biāo)與正常組相比均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01)。與模型組相比，各給藥組大鼠的血糖及果糖胺水平無顯著變化(P＞0.05)，但TC、TG與LDL均有顯著降低(P＜0.01)，除津力達(dá)組外，HDL有不同程度升高(P＜0.05、P＜0.01);與模型組相比，各給藥組大鼠mALB的減少均有高度統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，Scr與BUN也有不同程度下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05、P＜0.01)。
　　 4.腎臟病理形態(tài)學(xué)改變

6、r>　　 DM大鼠的腎小管明顯擴張，小管上皮細(xì)胞出現(xiàn)彌漫性中度空泡變性，但腎小球區(qū)域未能發(fā)現(xiàn)明顯病變。電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，模型組大鼠內(nèi)皮窗孔增大、腎小球基底膜呈節(jié)段性增厚、足突廣泛融合;各治療組大鼠的足突融合有不同程度改善，內(nèi)皮窗孔大小趨于正常。
　　 5.VEGF的蛋白表達(dá)情況
　　 模型組大鼠的VEGF表達(dá)范圍擴大、著色明顯增強，以擴張的腎小管上皮細(xì)胞著色最明顯;各給藥組中VEGF的表達(dá)與模型組相比均有不同程度減弱。

7、r>　　 6.Akt/mTOR通路中Akt與mTOR等蛋白的表達(dá)情況
　　 各組Akt、mTOR的總蛋白表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);模型組中p-Akt、p-mTOR的表達(dá)比正常組明顯增強(P＜0.01)，表明Akt/mTOR信號通路被激活;經(jīng)各藥物治療，p-Akt與p-mTOR的表達(dá)均比模型組減弱，差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1.通心絡(luò)聯(lián)合津力達(dá)可改善DN大鼠一般狀況，減少