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文檔簡介
1、白斑綜合征(WSS)自1988年首次發(fā)現(xiàn)以來,到2000年幾乎席卷世界沿海各國,對全球?qū)ξr養(yǎng)殖業(yè)造成毀滅性的打擊。至目前為止,由于對WSS仍無有效的治療方法,因此對其進行早期預(yù)防就顯得極為重要。番石榴葉水提取物可以有效地消除海水中WSSV的感染活性,具備開發(fā)成為針對WSSV水體消毒劑的可能性。為了確定其在對蝦養(yǎng)殖中使用的可行性,本文進行了以下三個方面的研究:
首先,在基礎(chǔ)飼料中添加六種比例的番石榴葉(0%、0.025%、0.0
2、5%、0.1%、0.2%、0.4%,分別標(biāo)記為G0、G1、G2、G3、G4、G5)飼喂斑節(jié)對蝦(體重為1.576±0.011 g)56天,研究番石榴葉對斑節(jié)對蝦生長和非特異性免疫功能的影響,評價番石榴葉在對蝦養(yǎng)殖中作為水體消毒劑使用的安全性。結(jié)果表明:試驗組斑節(jié)對蝦增重率均顯著高于對照組(P<0.05),其中G1組增重率最高,達到308.44%。飼料中添加番石榴葉投喂斑節(jié)對蝦可以提高對蝦血清和肝胰腺中酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(S
3、OD)、酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、一氧化氮合成酶(NOS)和溶菌酶(LSZ)的活力。其中血清中 PO、SOD,肝胰腺 SOD、ACP、AKP均在G1組最高,達到7.50U/ml、178.33 U/ml、57.32 U/g protein、32.67kim unit/g protein、27.10kim unit/g protein,除血清SOD外,均顯著高于對照組(P<0.05),后隨著番石榴葉添加比例的增加而降低。血
4、清ACP、AKP、LSZ和肝胰腺LSZ活力隨著番石榴葉添加比例的增加而增高,在G3組最高,達到6.79 kim unit/100ml、11.66 kim unit/100ml、53.95 U/ml和3459.95 U/mg protein,且均顯著高于對照組(P<0.05),后隨著添加比例的增加而降低。血清 TNOS活力隨著番石榴葉添加比例的增加而增高,在G4組最高,顯著高于對照組(P<0.05),達到64.80 U/ml,后隨著添加比
5、例的增加而降低。因此,在對蝦飼料中添加番石榴葉投喂斑節(jié)對蝦,不僅可以促進斑節(jié)對蝦生長,還可以提高對蝦的免疫機能,可以認(rèn)為作為水體消毒劑使用對對蝦不存在負(fù)面影響,是安全的。
其次,為了探討番石榴葉除了消除水體中WSSV的感染活性外,是否可以殺滅對蝦體內(nèi)的病毒,從而可以在飼料中使用的可行性,研究了番石榴葉在飼料中使用對斑節(jié)對蝦抗白斑綜合征病毒(WSSV)的影響,包括以下兩個方面的內(nèi)容:1、對人工感染 WSSV的對蝦投喂含不同濃度(
6、0%、0.1%、0.2%、0.4%、0.8%)番石榴葉的飼料,在試驗過程中觀察死亡情況,觀察治療效果;2、對連續(xù)飼喂添加不同濃度(0%、0.025%、0.05%、0.1%、0.2%、0.4%)番石榴葉3d、6d、12d、24d的對蝦分別進行人工感染W(wǎng)SSV,統(tǒng)計累計死亡率,觀察預(yù)防效果。結(jié)果顯示:治療試驗中飼喂含番石榴葉飼料的試驗組半數(shù)死亡時間均早于對照組;預(yù)防試驗中添加番石榴葉濃度為0.05%、連續(xù)飼喂6d或添加番石榴葉濃度為0.02
7、5%,連續(xù)飼喂12d,對蝦的半數(shù)死亡時間出現(xiàn)均比對照組晚。表明:對蝦感染 WSSV后再飼喂番石榴葉,番石榴葉對已感染斑節(jié)對蝦治療作用不明顯;而對蝦先飼喂番石榴葉后人工感染 WSSV,可明顯提高對蝦的抗病力,且番石榴葉的添加濃度和投喂時間長短對斑節(jié)對蝦抗 WSSV的能力均有影響,添加番石榴葉濃度為0.025%、連續(xù)飼喂12d和添加番石榴葉0.05%,連續(xù)飼喂6d,斑節(jié)對蝦抗病力均可明顯提高。
最后,本實驗利用有機萃取技術(shù),對番石
8、榴葉水提取物進行了初步分離,得到石油醚相(S)、乙酸乙酯相(Y)、正丁醇相(Z)和水相(W)四個組分。然后,通過人工感染實驗,確定了各組分抗WSSV的效果,并通過體外實驗研究了番石榴葉水提取物及各組分對WSSV的影響。人工感染的結(jié)果顯示:用乙酸乙酯相與正丁醇相這兩種組分分別處理WSSV后,對蝦在用WSSV人工感染后未出現(xiàn)死亡,而用石油醚組分處理WSSV后,對蝦在用WSSV人工感染后的第5天開始出現(xiàn)死亡,第12天時全部死亡,表明番石榴葉中
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