DNA跨損傷修復(fù)基因在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)研究.pdf

1、DNA跨損傷修復(fù)是一類(lèi)復(fù)制后修復(fù)，有研究證實(shí)DNA跨損傷修復(fù)基因在乳腺癌、肺癌和胃癌等人類(lèi)常見(jiàn)腫瘤中的表達(dá)上調(diào)，說(shuō)明其表達(dá)上調(diào)與腫瘤的發(fā)生有著密切聯(lián)系。但至目前為止還未有跨損傷修復(fù)基因在人原發(fā)腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)研究的報(bào)道。 目的：檢測(cè)DNA跨損傷修復(fù)通路中的REV1、Polζ、Polη、Polι和Polκ基因在不同病理級(jí)別膠質(zhì)瘤組織和正常腦組織中的定量表達(dá)分析，探討這些基因的表達(dá)水平與腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生、進(jìn)展的關(guān)系。 方法：臨

2、床收集85例人原發(fā)腦膠質(zhì)瘤組織（WHO標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)：II級(jí)20例、III級(jí)20例、IV級(jí)45例）和14例正常腦組織。軟件設(shè)計(jì)內(nèi)參基因GAPDH和6個(gè)DNA跨損傷修復(fù)基因：REV1、Polζ（REV3和REV7）、Polη、Polι和Polκ的引物。使用SYBR Green實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)，于7900HT熒光定量PCR儀上對(duì)所有標(biāo)本實(shí)時(shí)、定量PCR檢測(cè)跨損傷修復(fù)基因以及內(nèi)參基因的mRNA表達(dá)情況，并用SDS2.2圖像分析軟件進(jìn)行處理，通過(guò)?

3、Ct法對(duì)最后的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)合臨床資料分析跨損傷修復(fù)基因在不同級(jí)別膠質(zhì)瘤組織和正常腦組織中的mRNA表達(dá)情況及各基因在不同性別組和不用年齡組中的表達(dá)差異。 結(jié)果：與正常腦組織相比有4個(gè)跨損傷修復(fù)基因在II級(jí)、III級(jí)、IV級(jí)膠質(zhì)瘤中表達(dá)上調(diào)，包括REV3、REV7、Pol η和PolιP＜0.05）；在這4個(gè)跨損傷修復(fù)基因中，REV3在IV級(jí)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)均比在II級(jí)和III級(jí)中高，并有顯著性差異（P＜0.05）；Pol

4、ι在IV級(jí)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)比在II級(jí)中高（P＜0.05）。與正常腦組織相比，REV1和Polκ基因在IV級(jí)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)上調(diào)（P＜0.05），但在II級(jí)和III級(jí)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)無(wú)明顯差異（P＞0.05）；Polκ基因在在IV級(jí)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)比在II級(jí)中高（P＜0.05）。結(jié)合臨床資料，跨損傷修復(fù)基因在不同性別組和不用年齡組中的表達(dá)無(wú)明顯差異（P＞0.05）。通過(guò)Spearman秩相關(guān)分析表明，跨損傷修復(fù)基因REV1、REV3、Pol η、

5、Pol ι和Pol κ的表達(dá)量與腫瘤病理分級(jí)呈正相關(guān)（P＜0.01）。 結(jié)論 REV1、REV3、REV7、Polκ、Polι和Polη等DNA跨損傷修復(fù)基因在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)上調(diào)，并且其表達(dá)量與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)（除REV7外），說(shuō)明這些基因的表達(dá)上調(diào)與膠質(zhì)瘤的發(fā)生密切相關(guān)。SYBR Green實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)為多個(gè)基因的同時(shí)定量表達(dá)提供了一種準(zhǔn)確、快速、有效的高通量檢測(cè)技術(shù)，可用于發(fā)現(xiàn)更多在膠質(zhì)瘤中差異表達(dá)的腫瘤相關(guān)基因，