海參腸道產(chǎn)蛋白酶菌的分離鑒定及其在海參下腳料中的應用.pdf

1、QngdaoAgnculturalUniversityTheThesisofProfessionalMasterIsolationandIdentificationofaProteaseProducingBacteriafromTractofApostichopusjaponicasandtheStudyofItsUtilizationinSeaCucumberLeftoversGraduatewithProfessionalMaste

2、rDegree：Mentor：PiaoMeiziSecondMentor：LuanHongjieTypeofProfessionalDegree：MasterofEngineeringAcademicfield：FoodEngineering海參腸道產(chǎn)蛋白酶菌的分離鑒定及其在海參下腳料中的應用摘要本論文通過透明圈法和酶活性測定，從刺參(Apostichopusjaponicus)胃腸道中篩選獲得一株產(chǎn)蛋白酶活性菌株，命名為QD心1，結(jié)合

3、生理生化特征與16SrRNA序列分析法，對該茵進行鑒定。研究了菌株的最適發(fā)酵條件，考察了碳源、氮源、發(fā)酵時間、培養(yǎng)溫度、起始pH值等因素對菌株產(chǎn)蛋白酶的影響。將該菌株應用于發(fā)酵海參下腳料——海參腸，以肽含量為指標探究了菌株發(fā)酵海參腸的最佳條件，并對發(fā)酵產(chǎn)物進行了活性測定。把利用QDI正1菌株發(fā)酵海參腸所得的發(fā)酵液應用于多肽口服液的調(diào)制，得到一種風味獨特，營養(yǎng)豐富的海參腸口服液。具體結(jié)果如下：1菌種篩選及鑒定將分離得到的產(chǎn)蛋白酶茵命名為Q

4、Dm1，該菌株為革蘭氏陽性菌，桿狀，兩端鈍圓，有茅孢。菌落為乳白色、圓形、凸起、邊緣整齊濕潤的光滑型小茵落。16SrRNA全序列分析顯示QD旺1全序列由1450bp組成，QD研l(wèi)與ThalassobacillusspLYl8的同源性為993％，屬于細菌，厚壁茵門，桿菌綱，芽孢桿菌目，芽孢桿菌科，Thalassobacillus屬。2產(chǎn)酶發(fā)酵條件優(yōu)化經(jīng)單因素和正交試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)：ThalassobacillusspQDHF1菌株在添加糖類為

5、碳源的培養(yǎng)基上會產(chǎn)酸抑制菌株產(chǎn)酶：因此，當在不添加糖類的培養(yǎng)基上，以酵母膏為碳源，蛋白胨為氮源，培養(yǎng)基初始pH值80，培養(yǎng)溫度30℃的條件下振蕩培養(yǎng)72h，所產(chǎn)蛋白酶活力最高，酶活力為763U／mL。3海參下腳料發(fā)酵將菌株ThalassobacillusspQDIIr一1應用于發(fā)酵海參下腳料得到海參下腳料發(fā)酵液，對不同濃度下發(fā)酵液清除DPPH自由基、羥自由基和超氧陰離子自由基的活性進行研究發(fā)現(xiàn)，海參下腳料發(fā)酵產(chǎn)物對3種自由基均有清除作用