產(chǎn)低溫蛋白酶菌株的分離鑒定及其酶的提純與特性研究.pdf

1、本論文從土壤中分離篩選出一株產(chǎn)低溫蛋白酶的菌株HL221，并進(jìn)行了菌株鑒定、誘變提高酶活、發(fā)酵條件優(yōu)化、粗酶的提純和酶學(xué)特質(zhì)的研究。結(jié)果如下：1.菌株的分離篩選及鑒定　　經(jīng)過(guò)富集培養(yǎng)和分離純化，獲得了產(chǎn)低溫蛋白酶的菌株HL221。經(jīng)形態(tài)學(xué)觀察、生理生化特征研究及16SrDNA序列比對(duì)結(jié)果表明該菌屬于金黃桿菌屬(Chryseobacteriumsp.)菌株。2.紫外線誘變提高酶活　　通過(guò)不同時(shí)間紫外照射進(jìn)行菌種誘變，結(jié)果表明30s照射

2、時(shí)間下，菌株產(chǎn)酶效果最佳，酶活由原出發(fā)菌株的110U/mL提高到230U/mL。3.發(fā)酵條件優(yōu)化　　通過(guò)單因子試驗(yàn)和正交試驗(yàn)，在搖瓶條件下對(duì)菌株的碳源、氮源、金屬離子、培養(yǎng)溫度、pH、接種量等產(chǎn)酶條件進(jìn)行了優(yōu)化。得到了菌株的最適產(chǎn)酶條件(g.L-1)為：葡萄糖30，蛋白胨15，Mn2+0.4，Tween800.1，K2HPO47，KH2PO43，培養(yǎng)溫度25℃，培養(yǎng)基初始pH7，接種量為2％～4％。在此優(yōu)化條件下酶活可達(dá)到305.9U