酵母菌的分離、篩選以及對柑橘保鮮的機(jī)理研究.pdf

1、柑橘果品安全(無毒)防腐保鮮是國內(nèi)外關(guān)注的問題，它關(guān)系到人體的健康及果品貿(mào)易、柑橘產(chǎn)業(yè)和農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。多年來，國內(nèi)外科技工作者非常重視無毒防腐保鮮柑橘的研究。由于研究手段和方法等問題，至今沒有理想的成果投產(chǎn)。本研究旨在利用柑橘果實表面及柑橘根際土壤中的有益酵母菌，研究生物防腐保鮮，以菌殺菌，以菌抑菌，以生物制劑代替化學(xué)防腐保鮮劑，克服化學(xué)藥劑對人體的毒害作用，提高柑橘果品防腐保鮮效果，主要結(jié)果如下： 1.酵母菌的分離、篩選和鑒

2、定從果園及柑橘果實傷口處中共分離和篩選了381株酵母菌(yeast)。經(jīng)過離體和活體實驗，篩選出一株能夠有效防治柑橘采后青、綠霉病的拮抗菌株——34-9。通過形態(tài)學(xué)觀察和生理生化實驗，在確定屬之后，根據(jù)屬的具體特征選擇與本屬的鑒定有關(guān)的實驗，進(jìn)一步鑒定表明該菌株屬于真菌門半知菌綱叢梗孢目，隱球酵母科，克勒克酵母屬(Kloeckera)的檸檬形克勒克酵母(Kloeckeraapiculata)。 2.菌株(34-9)在活體上對柑橘

3、青、綠霉病的抑制效果評價在25℃下，2×108CFU/ml的菌株(34-9)的懸浮液能夠完全抑制病菌孢子濃度為2×104個/ml時柑橘果實青霉病(PenicilliumitalicumWehmer.)的發(fā)生，對柑橘果實綠霉病(PenicilliumdigitatumSacc.)也有極好的抑制效果；當(dāng)菌株(34-9)的濃度降低為2×107CFU/ml時，對柑橘青、綠霉病的抑制效果相對較差，但可以延緩病害的發(fā)生。 3.菌株(34-9

4、)在柑橘果實傷口處的生長情況菌株(34-9)在有無柑橘青、綠霉病存在的情況下均能迅速在柑橘果實傷口定殖，接種48h后，數(shù)量可增加20倍以上；在有病菌存在的情況下，24h后菌株(34-9)的數(shù)量就增加66倍。菌株(34-9)和病菌孢子的接種時間與防治的效果有關(guān)，先接種菌株(34-9)的抑菌效果顯著地好于同時或后于病菌接種的效果。 4.菌株(34-9)與常規(guī)的果實采后處理措施的研究菌株(34-9)能夠與常規(guī)的果實采后處理措施如化學(xué)殺

5、菌劑、低溫冷藏條件相結(jié)合。菌株(34-9)與低濃度的殺菌劑如多菌靈等混合使用，可以達(dá)到高濃度殺菌劑的抑菌效果；溫度對菌株(34-9)的抑菌活力沒有明顯影響，無論是在室溫還是在低溫條件下，菌株(34-9)都有同樣的抑菌效果。以上結(jié)果表明該菌株有很好的開發(fā)前景。 5.菌株(34-9)的拮抗機(jī)理的初步探討用菌株(34-9)處理對柑橘青、綠霉病的防腐保鮮已經(jīng)取得了較好的效果，但對它的抑菌機(jī)理的研究還比較滯后。根據(jù)其它拮抗菌機(jī)理的研究進(jìn)展

6、，本文對菌株(34-9)的抑菌機(jī)理研究取得如下初步結(jié)果： 1)菌株(34-9)不產(chǎn)生抗生素直接抑制病菌生長。其上清液、滅菌液均不能有效地抑制病菌孢子的萌發(fā)，但在“invivo”上能夠明顯地抑制柑橘青、綠霉病害的發(fā)生。 2)電鏡實驗結(jié)果：菌株(34-9)緊緊包圍在病原菌菌絲周圍或附著在病原菌菌絲上，致使病原菌的原生質(zhì)體濃縮，菌絲畸形。 3)菌株(34-9)能迅速在柑橘果實傷口定殖，接種48h后，數(shù)量可增加20倍以上