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文檔簡介
1、背景目的:結(jié)直腸是消化道最后一段腸管,主要生理功能是吸收腸腔內(nèi)食糜殘液中的水和電解質(zhì)。結(jié)腸還具有分泌電解質(zhì)的作用,腸道的吸收和分泌過程通過內(nèi)分泌,旁分泌,自分泌以及神經(jīng)和免疫等因素的調(diào)節(jié)處于動態(tài)平衡。體內(nèi)的激素、腦-腸肽、免疫因子和神經(jīng)遞質(zhì)等通過第二信使(如cAMP,cGMP,和Ca2+等)來調(diào)控腸道的吸收和分泌。生理狀態(tài)下生電性的Cl-分泌作為防止腸粘膜受到有害刺激的基本屏障可以使腸粘膜表面水化。它的分泌異常就會導(dǎo)致許多疾病,如分泌性
2、腹瀉,囊性纖維變性。HCO3-和Cl-一樣是正常情況下腸粘膜液體組成中的一種重要成分,它的分泌幾乎在胃腸道各個(gè)部位都可以發(fā)生。在遠(yuǎn)端結(jié)腸,HCO3-的分泌能夠使腸道產(chǎn)生的H2S轉(zhuǎn)變?yōu)殛庪x子硫化物,從而可以顯著降低腸道H2S的濃度而達(dá)到解毒目的。由于H2S誘導(dǎo)的氧化過程與潰瘍性結(jié)腸炎(ulcercolonitis,UC)病人結(jié)腸上皮β-氧化造成的損害相似,炎性腸病(inflammationboweldisease,IBD),潰瘍性結(jié)腸炎(
3、UC),結(jié)直腸癌(colonicrectalcancer,CRC)病人的糞便中H2S的濃度超過正常,以及在急性潰瘍性結(jié)腸炎和炎性腸病病人中糞便中HCO3-分泌量較正常人顯著減少,因此認(rèn)為HCO3-分泌異??赡苁怯绊慖BD,UC和CRC發(fā)病的環(huán)境因素之一。 過去已有大量關(guān)于遠(yuǎn)端結(jié)腸離子轉(zhuǎn)運(yùn)的研究,但遠(yuǎn)端結(jié)腸不同節(jié)段的陰離子分泌機(jī)制未見有報(bào)道。因此本實(shí)驗(yàn)采用升高細(xì)胞內(nèi)cAMP的工具藥forskolin(FSK),結(jié)合短路電流(sho
4、rt-circuitcurrent,ISC)技術(shù),研究大鼠不同節(jié)段的遠(yuǎn)端結(jié)腸粘膜依賴cAMP的陰離子分泌機(jī)制及其異同。 材料與方法:采用健康成年雄性SD大鼠,斷頸處死之,立即取出其遠(yuǎn)端結(jié)腸,將結(jié)腸從遠(yuǎn)端至近端分為四段,分別定義為DC1(肛直腸段,距肛門約1~2cm)、DC2(遠(yuǎn)端結(jié)腸第二段,距肛門約3cm)、DC3(遠(yuǎn)端結(jié)腸第三段,距肛門約4cm)、DC4(遠(yuǎn)端結(jié)腸第四段,距肛門約5~7cm)。預(yù)實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)DC3與DC4具有
5、相似的短路電流特性,而DC1與之差異較大,因此我們選DC1和DC4作為研究重點(diǎn)。分離出粘膜層,將粘膜置于短路電流(short-circuitcurrent,Isc)裝置中,記錄FSK引起的結(jié)腸粘膜Isc的變化,并觀察不同的阻斷劑或激動劑對FSK引起的Isc的影響。結(jié)果用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示,多樣本均數(shù)比較采用單因素的方差分析,再用Newman-Keuls檢驗(yàn),兩樣本均數(shù)比較采用配對設(shè)計(jì)的t檢驗(yàn),或成組設(shè)計(jì)的t檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。
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