傷寒沙門氏菌致病仔豬胃腸道組織中蛋白酶激活受體2的定位研究.pdf

1、本試驗通過H．E．染色觀察腹瀉仔豬胃腸道病理變化，和免疫組織化學染色觀察斷奶后PAR．2在正常與腹瀉仔豬體內(nèi)的分布及量的變化規(guī)律，研究PAR-2與斷奶仔豬腹瀉之間的關(guān)系。 方法：取斷奶仔豬的胃腸道，按照組織學特性分別分組為：胃賁門區(qū)、胃底區(qū)、胃幽門區(qū)，十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸、盲腸段。進行多聚甲醛固定，常規(guī)包埋，4岬切片。同時，無菌取腸道內(nèi)容物作微生物學病原菌的分離鑒定。健康仔豬組織作對照，運用免疫組織化學原理，各組織石蠟切片

2、用山羊抗人PAR-2多克隆抗體作一抗，進行SABC法染色，觀察組織內(nèi)PAR-2定位部位，并同步進行H．E．染色，鏡檢拍照比較分析。 結(jié)果表明： 1．腹瀉仔豬部分組織有干酪樣病變，全身漿膜有不同程度的出血點，胃腸道內(nèi)容物稀薄，粘膜表面覆著大量粘液，腸壁厚薄不均，彈力下降；培養(yǎng)分離鑒定致病菌為傷寒沙門氏菌； 2．HE染色觀察，病理組織學變化主要表現(xiàn)為粘膜上皮細胞脫落變性，腸壁平滑肌變薄，固有層內(nèi)中性粒細胞、嗜酸性粒細

3、胞、淋巴細胞等浸潤、水腫，粘膜下層淋巴小結(jié)增生，分別表現(xiàn)出不同的炎癥程度。 3．運用免疫組織化學分析，發(fā)現(xiàn)仔豬胃腸道廣泛的表達PAR-2，特別在粘膜上皮細胞的頂端，腺細胞的基底部，血管上皮細胞、成纖維細胞、中性粒細胞、嗜酸性粒細胞等，所設對照組均未見陽性反應；并且，PAR-2在腹瀉仔豬比正常仔豬的表達增加，特別是炎性細胞的強表達。 綜上所述，PAR-2在胃腸道廣泛存在，小腸表達量略低；同時發(fā)病初期炎癥細胞強表達，提示PA