糖尿病大鼠腎小管間質(zhì)早期病變及干預(yù)治療.pdf

1、目的:制作2型糖尿病大鼠模型，觀察糖尿病大鼠早期病理生理改變、腎組織toll樣受體4(Toll-Like Receptor4，TLR4)的表達以及腎間質(zhì)CD68陽性細胞數(shù)，采用腎康注射液(SKI)作為干預(yù)治療措施，探討腎小管間質(zhì)病變是否為糖尿病大鼠早期病變以及SKI對糖尿病大鼠腎小管間質(zhì)損害的保護作用及可能機制。
　　方法:4周齡雌性SD大鼠，在高糖、高脂飲食（常規(guī)飼料+10％蔗糖+10％豬油+10％蛋黃粉）4周的基礎(chǔ)上，采用小劑

2、量鏈脲佐菌素(35mg/kg)腹腔注射以建立2型糖尿病動物模型，血糖≥16.67mmol/L以及高胰島素-正葡萄糖鉗夾試驗顯示胰島素抵抗明顯為模型成功。造模成功后，將大鼠隨機分為糖尿病組(DM組)和糖尿病SKI干預(yù)組(DMSK組)，同時設(shè)立正常對照組（NC組）。DMSK組每天按照6.0ml/kg體重的劑量腹腔注射SKI原液的四倍濃縮液，其余兩組每天腹腔注射等容量的生理鹽水，共干預(yù)治療8周。觀察大鼠的一般狀態(tài)、血糖(GLu)、血肌酐(Sc

3、r)、血尿素氮(BUN)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)及胰島素抵抗情況改變。SKI給藥后每2周收集大鼠隨機尿，檢測尿微量白蛋白(mALB)及尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)。實驗結(jié)束前收集大鼠24小時尿液，檢測尿蛋白定量與尿肌酐水平，并計算內(nèi)生肌酐清除率(CCr)。實驗結(jié)束后觀察大鼠腎臟病理變化;應(yīng)用免疫組化方法，檢測腎組織TLR4表達及腎間質(zhì)CD68陽性細胞數(shù)的變化。
　　結(jié)果:
　　1) DM組飲水量、尿

4、量明顯增多，活動遲緩，體重下降，體毛干枯萎黃無光澤，部分大鼠可見雙眼白內(nèi)障表現(xiàn)，經(jīng)SKI治療后，DMSK組大鼠的上述病變情況均有不同程度的改善，其中體重(P＜0.01）和腎指數(shù)(P＜0.01）的改善最為明顯。
　　2)DM組大鼠的GLu、BUN、CCr、24小時尿蛋白定量較NC組明顯升高(P＜0.01)，經(jīng)SKI治療8周后，上述指標明顯降低(P＜0.01)，但三組間的TG、TC比較差別無統(tǒng)計學(xué)意義。另外，經(jīng)SKI治療8周后DMSK

5、組穩(wěn)態(tài)葡萄糖輸注速率(Glucose Infusion Rate，GII)下降明顯，與DM組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，并且較SKI給藥前的GIR有明顯改善(P＜0.01)。
　　3)造模成功后第6周，DM組大鼠尿液mALB水平開始高于NC組大鼠(P＜0.01)且呈持續(xù)升高趨勢，經(jīng)SKI治療后，第8、10、12周， DMSK組尿液mALB水平較DM組明顯降低(P＜0.01);造模成功后第8周，DM組大鼠尿NAG開始升高，第1

6、0、12周明顯高于NC組(P＜0.01)，SKI治療后，上述各時間點尿NAG水平均明顯下降。
　　4)腎臟病理檢查顯示DM組大鼠的腎小管出現(xiàn)廣泛空泡樣變性改變，間質(zhì)炎細胞浸潤明顯，腎小球體積僅輕度增大，系膜細胞可見少量增殖，系膜基質(zhì)輕微增多。SKI治療后，上述情況均有較大改善，腎小球體積、系膜區(qū)面積/腎小球面積、腎小管評分等病理定量指標均低于DM組(P＜0.01)。
　　5)免疫組化檢測結(jié)果顯示，DM組大鼠腎小管上TLR4的