microRNA-363通過(guò)下調(diào)S1PR1抑制肝癌細(xì)胞增殖.pdf

1、1型1-磷酸鞘氨醇受體(S1PR1)是一種 G蛋白偶聯(lián)受體,屬于1-磷酸鞘氨醇受體家族,是重要的信號(hào)分子,通過(guò)與其配體1-磷酸鞘氨醇(S1P)結(jié)合調(diào)解下游信號(hào)通路活性。S1PR1廣泛表達(dá)與各種組織和器官細(xì)胞表面,參與了多種生物學(xué)功能。
　　前期研究證實(shí) S1PR1作為癌基因,通過(guò)上調(diào)很多信號(hào)通路,促進(jìn)了肝癌的發(fā)生發(fā)展。首先,相對(duì)正常的人胎肝細(xì)胞,肝細(xì)胞癌細(xì)胞高表達(dá) S1PR1分子。而相對(duì)正常的人胎肝細(xì)胞,肝癌細(xì)胞則低表達(dá) mir-

2、363。其次,S1PR1調(diào)節(jié)了很多經(jīng)典信號(hào)通路的活性,例如 ERK和 STAT3。第三,ERK和 STAT3信號(hào)通路調(diào)控了很多下游靶基因表達(dá),涉及了多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展。
　　因此,我們嘗試研究肝癌細(xì)胞中S1PR1高表達(dá)的機(jī)制,并將研究聚焦于microRNA對(duì)S1PR1的調(diào)控機(jī)制上,取得以下的結(jié)果:
　　1.通過(guò)生物信息學(xué)預(yù)測(cè),S1PR1 mRNA3′-UTR上有mir-363的結(jié)合位點(diǎn),并通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證實(shí)mir-

3、363在S1PR13′-UTR上的結(jié)合位點(diǎn)位于nt1256-1262處,并具有生物學(xué)功能。
　　2.我們通過(guò)qPCR和Western Blot發(fā)現(xiàn),相對(duì)人胎肝細(xì)胞系,肝癌細(xì)胞系高表單S1PR1而低表達(dá)mir-363。
　　3.通過(guò)qPCR和Western Blot,我們發(fā)現(xiàn)mir-363能夠在mRNA和蛋白水平下調(diào)S1PR1的表達(dá)。
　　4.通過(guò)CCK-8實(shí)驗(yàn),我們證實(shí)mir-363能夠抑制肝癌細(xì)胞增殖。
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