MiR-221通過抑制脂聯(lián)素受體1促進肝癌細胞發(fā)生上皮間質轉化.pdf

1、本文分為以下兩個部分進行探討：
　　第一部分 miR-221在肝癌組織中高表達,且其含量與腫瘤惡性程度正相關
　　背景：MiRNA表達異常與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關，miR-221在胃癌，結腸癌，食管癌，胰腺癌中高表達，其在肝癌中的表達量及其生物學效應有待進一步探索。
　　目的：研究肝癌中miR-221表達量及其對腫瘤侵襲及轉移能力的影響。
　　方法：用實時定量PCR檢測肝癌組織及正常肝組織中miR-221的表達量，

2、系統(tǒng)分析 miR-221表達量與腫瘤大小，淋巴結轉移，微血管浸潤及患者預后等臨床指標的關系。在肝癌細胞系中過表達外源性 miR-221或抑制細胞內miR-221并觀察腫瘤侵襲與轉移功能的變化。
　　結果：肝癌中miR-221表達升高，且miR-221含量與腫瘤大小，淋巴結轉移及微血管浸潤正相關。在肝癌細胞系中，上調 miR-221可促進腫瘤的浸潤及轉移，抑制 miR-221可起到相反作用。我們進一步發(fā)現(xiàn)，在肝癌細胞系中上調 miR

3、-221可促進腫瘤發(fā)生上皮-間質轉化，抑制 miR-221可起到相反作用。
　　結論：肝癌中 miR-221高表達，其表達量與腫瘤惡性程度正相關，在肝癌細胞系中過表達miR-221可促進腫瘤發(fā)生上皮-間質轉化，促進腫瘤浸潤及轉移，抑制miR-221可起到相反作用。
　　第二部分 miR-221通過抑制AdipoR1促進肝癌細胞發(fā)生上皮-間質轉化
　　背景：miR-221可通過抑制PTEN，PDLIM2，P27等促進腫瘤

4、增殖，AdipoR1是脂聯(lián)素最重要的受體之一，抑制AdipoR1可能促進腫瘤發(fā)生上皮-間質轉化。
　　目的：研究miR-221是否可通過抑制AdipoR1促進肝癌細胞發(fā)生上皮-間質轉化并探索相關機制。
　　方法：過表達或抑制miR-221后觀察AdipoR1 mRNA及蛋白的改變，雙熒光素酶實驗驗證miR-221是否可結合于AdipoR1 mRNA的3’非編碼區(qū)并發(fā)揮轉錄后調控。抑制或過表達 AdipoR1，觀察肝癌細胞上皮

5、-間質轉化是否改變。過表達或抑制AdipoR1后觀察與上皮-間質轉化相關的信號通路的改變。
　　結果：過表達miR-221可下調AdipoR1的蛋白表達，抑制miR-221可上調AdipoR1蛋白表達，但AdipoR1 mRNA水平沒有明顯變化，雙熒光素酶實驗證實miR-221可結合于AdipoR1 mRNA的3’非編碼區(qū)并抑制其活性。抑制AdipoR1可促進肝癌細胞發(fā)生上皮-間質轉化，過表達AdipoR1可逆轉由過表達miR-2