紫紺型先心病循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量和功能變化的機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討紫紺型先心病VEGF、SDF-1的血清水平和循環(huán)EPCs數(shù)量及功能變化的關(guān)系，在分子、細(xì)胞水平，闡明他們之間的聯(lián)系和作用機(jī)制。 方法：采用ELISA法檢測(cè)外周血清SDF-1和VEGF的水平；采用密度梯度離心法和貼壁法分離內(nèi)皮祖細(xì)胞，體外擴(kuò)增培養(yǎng)；采用DiI標(biāo)記的乙?；兔芏戎鞍?acLDL-DiI)和FITC標(biāo)記的荊豆凝集素-1(FITC-UEA-1)染色細(xì)胞，激光共聚焦顯微鏡初步鑒定，UEA-1和DiLDL雙染色陽

2、性細(xì)胞被認(rèn)為是正在分化的EPCs；并用倒置熒光顯微鏡，對(duì)每孔進(jìn)行計(jì)數(shù)(計(jì)數(shù)15個(gè)隨機(jī)選擇的×200視野的EPCs)。采用MIT比色法、改良的Boyden小室和粘附能力測(cè)定實(shí)驗(yàn)，觀察EPCs的增殖能力、遷移能力及粘附能力。并用回歸分析方法分析VEGF、SDF-1水平與EPCs數(shù)量及功能的相關(guān)性。 結(jié)果：紫紺型先心病患者VEGF、SDF-1的血清水平明顯高于非紫紺組，兩組比較：VEGF(ng/L)：201.42±44.74 vs 1

3、13.56±35.62；SDF-1(ng/L)：3.4535±1.0732 vs 1.05368±0.98692；紫紺型先心病患者內(nèi)皮祖細(xì)胞的數(shù)量明顯高于非紫紺組，兩組比較：5915±1016 vs 3118±717，200倍視野；紫紺型先心病患者內(nèi)皮祖細(xì)胞的功能明顯強(qiáng)于非紫紺組，兩組比較：1.增殖能力：0.3377±0.0205 vs 0.2657±0.0142，490nm光吸收值；2.遷移能力：146.6±9.24 vs 91.84

4、±8.58，200倍視野的細(xì)胞數(shù)；3.黏附能力：149±1.58 vs 112.6±7.02，30份鐘的貼壁細(xì)胞數(shù)。紫紺型先心病患者的VEGF、SDF-1的血清水平與EPCs數(shù)量及功能變化表現(xiàn)出明顯的一致性，其相關(guān)系數(shù)分別為0.675、0.835、0.724。 結(jié)論： 1.紫紺型先心病外周血中存在著大量EPCs，且數(shù)量及功能明顯增加，可以作為自體種子細(xì)胞的來源之一。 2.VEGF、SDF-1的高表達(dá)可能促進(jìn)循環(huán)E