紫紺型先心病循環(huán)內(nèi)皮祖細胞數(shù)量和功能變化的機制研究.pdf

1、目的：探討紫紺型先心病VEGF、SDF-1的血清水平和循環(huán)EPCs數(shù)量及功能變化的關系，在分子、細胞水平，闡明他們之間的聯(lián)系和作用機制。 方法：采用ELISA法檢測外周血清SDF-1和VEGF的水平；采用密度梯度離心法和貼壁法分離內(nèi)皮祖細胞，體外擴增培養(yǎng)；采用DiI標記的乙?；兔芏戎鞍?acLDL-DiI)和FITC標記的荊豆凝集素-1(FITC-UEA-1)染色細胞，激光共聚焦顯微鏡初步鑒定，UEA-1和DiLDL雙染色陽

2、性細胞被認為是正在分化的EPCs；并用倒置熒光顯微鏡，對每孔進行計數(shù)(計數(shù)15個隨機選擇的×200視野的EPCs)。采用MIT比色法、改良的Boyden小室和粘附能力測定實驗，觀察EPCs的增殖能力、遷移能力及粘附能力。并用回歸分析方法分析VEGF、SDF-1水平與EPCs數(shù)量及功能的相關性。 結果：紫紺型先心病患者VEGF、SDF-1的血清水平明顯高于非紫紺組，兩組比較：VEGF(ng/L)：201.42±44.74 vs 1

3、13.56±35.62；SDF-1(ng/L)：3.4535±1.0732 vs 1.05368±0.98692；紫紺型先心病患者內(nèi)皮祖細胞的數(shù)量明顯高于非紫紺組，兩組比較：5915±1016 vs 3118±717，200倍視野；紫紺型先心病患者內(nèi)皮祖細胞的功能明顯強于非紫紺組，兩組比較：1.增殖能力：0.3377±0.0205 vs 0.2657±0.0142，490nm光吸收值；2.遷移能力：146.6±9.24 vs 91.84

4、±8.58，200倍視野的細胞數(shù)；3.黏附能力：149±1.58 vs 112.6±7.02，30份鐘的貼壁細胞數(shù)。紫紺型先心病患者的VEGF、SDF-1的血清水平與EPCs數(shù)量及功能變化表現(xiàn)出明顯的一致性，其相關系數(shù)分別為0.675、0.835、0.724。 結論： 1.紫紺型先心病外周血中存在著大量EPCs，且數(shù)量及功能明顯增加，可以作為自體種子細胞的來源之一。 2.VEGF、SDF-1的高表達可能促進循環(huán)E