氧化型低密度脂蛋白對內(nèi)皮祖細(xì)胞存活和功能的影響及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：研究氧化型低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein，oxLDL)對EPC存活及功能的影響，oxLDL對EPC的作用是否與內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelialnitricoxidesynthase，eNOS)有關(guān)及是否由血凝素樣oxLDL受體(lectin-likeoxLDLreceptor，LOX-1)介導(dǎo)。 方法：分離、培養(yǎng)EPC，然后與不同濃度oxLDL(分別為10、25、50μg

2、/mL)、硝基精氨酸甲酯(N-nitro-l-argininemethylester，L-NAME)或triciribine孵育48h，其中，一部分EPC與左旋精氨酸或LOX-1阻斷抗體(LOX-1monoclonalantibody，LOX-1mAb)預(yù)處理后，再與50μg/mLoxLDL孵育。然后，檢測EPC凋亡率及遷移、粘附和體外血管形成能力，同時(shí)檢測一氧化氮(nitricoxide，NO)的產(chǎn)生，磷酸化Akt、eNOS及LOX-

3、1的蛋白表達(dá)，eNOS和LOX-1的mRNA表達(dá)。 結(jié)果：臍血CD34+細(xì)胞培養(yǎng)14d后可形成梭形的貼壁細(xì)胞，經(jīng)證明梭形細(xì)胞為EPC。oxLDL劑量為25μg/mL、50μg/mL時(shí)，EPC凋亡率明顯增加，遷移、粘附及體外血管形成能力明顯下降。同時(shí)，NO的產(chǎn)生量明顯下降。oxLDL的作用能被左旋精氨酸或LOX-1mAb所抑制。L-NAME和triciribine具有與oxLDL相似的作用，同樣誘導(dǎo)EPC凋亡，抑制EPC功能。