辛伐他汀對慢性阻塞性肺疾病大鼠肺組織IL-17及相關因子的影響.pdf

1、目的:通過觀察白介素-17（interleukin-17，IL-17）、白介素-21（interleukin-21，IL-21）及轉錄因子視黃酸相關孤兒受體γt(orphan nuclearreceptor gamma t，RORγt)在吸煙導致慢性阻塞性肺疾病(ChronicObstructive Pulmonary Disease，COPD)大鼠肺組織中的表達，初步探討他汀類藥物在COPD中的作用機制。
　　方法:
　　

2、1.單純被動吸煙建立吸煙大鼠動物模型:(1)將36只大鼠隨機分為三組:對照組（Control）、吸煙組(Somking)及治療組(Treatment)。除對照組外，另外兩組大鼠每日在熏煙箱內給與煙霧干預，每日2次，每次吸煙30支，每次吸煙1小時，日間兩次吸煙間隔4-5小時，共16周，并同時給與治療組大鼠辛伐他汀(5mg/kg)灌胃干預，每日一次。(2)16周后，測量大鼠體重、計數支氣管肺泡灌洗液(bronchveolar lavage

3、fluid，BALF)中白細胞數量及分類，并對肺組織病理形態(tài)學進行觀察。
　　2.采用免疫組化及Real-TimePCR分別對大鼠肺組織IL-17、IL-21及RORγt蛋白和mRNA的表達進行測定。
　　結果:
　　1.實驗前三組大鼠體重無明顯差異(P＞0.05)。吸煙結束后，Somking組大鼠及Treatment組大鼠較Control組大鼠體重下降（均P＜0.01），而Somking組大鼠與Treatment組大

4、鼠之間體重無明顯變化（均P＞0.05）。Somking組BALF各炎癥細胞數相對于Control組明顯增多（均P＜0.01）。內襯間隔(pulmonary mean linear intercept，MLI)顯著增加(P＜0.01)，平均肺泡數(mean alveolar numbers，MAN)顯著降低(P＜0.01)。治療組白細胞總數較吸煙組明顯下降(P＜0.01)，中性粒細胞個數及巨噬細胞個數下降(P＜0.01)，吸煙組大鼠與治療

5、組大鼠相比較，平均肺泡數(meanalveolar numbers)降低(P＜0.01)。內襯間隔(MLI)無明顯改變(P＞0.05)。
　　2.免疫組化結果顯示:在肺泡間隔內，IL-17陽性細胞在Control組、Smoking組和Treatment組的表達分別為:（5.20±4.94）個/mm2、（90.00±14.02）個/mm2和（72.80±10.79）個/mm2; RORγt陽性細胞在Control組、Smoking組

6、和Treatment組的表達分別為:（6.80±5.85）個/mm2、(77.27±7.95)個/mm2和（65.40±5.23）個/mm2;IL-21陽性細胞在Control組、Smoking組和Treatment組的表達分別為:（8.20±3.16）個/mm2、（61.18±9.16）個/mm2和（49.40±3.34）個/mm2，三組之間各因子均存在顯著性差異(P＜0.01)。支氣管粘膜上皮內，IL-17陽性細胞的百分比在Cont

7、rol組、Smoking組和Treatment組分別為:（8.60±4.84）％、（77.09±6.49）％和（68.80±10.09）％;RORγt陽性細胞的百分比在Control組、Smoking組和Treatment組分別為:（7.60±3.78）％、（79.45±6.80）％和（68.50±10.37）％;IL-21陽性細胞的百分比為:Control組（6.20±5.07）％，Smoking組（58.45±6.56）％，Trea

8、tment組（48.90±4.15）％，三組之間各因子也均存在顯著性差異(P＜0.01)。肺泡間隔內的IL-17陽性細胞數與平均內襯間隔(MLI)呈正相關（r=0.729，P＜0.01），與平均肺泡數呈負相關（r=-0.889，P＜0.01）。
　　3.熒光定量PCR結果顯示:肺組織中IL-17mRNA的ΔCT表達水平在Control組、Somking組和Treatment組分別為(4.78±0.51)、(1.96±0.60)和(

9、3.56±0.15)，三組之間存在明顯差異(P＜0.01);RORγt mRNA的ΔCT表達水平在Control組、Somking組和Treatment組的分別為(4.69±0.82)、(2.68±0.08)和(3.89±0.21)，三組之間存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05）;IL-21mRNA的ΔCT表達水平在Control組、Somking組和Treatment組的分別為(5.51±0.86)、（1.99±0.61）和（3.59±0.1