豬到人異種心臟移植超急性排斥反應(yīng)的研究.pdf

1、隨著基礎(chǔ)研究的不斷深入及外科技術(shù)的日益完善,器官移植已成為救治多種器官功能衰竭患者生命的首選方法;然而隨著人體器官移植適應(yīng)癥的增加和移植成功率的提高,器官移植手術(shù)數(shù)量大幅增加,造成臨床上器官來源呈現(xiàn)嚴(yán)重短缺.為了解決這個問題,近年來,異種器官作為緩解人體器官短缺的有效措施之一受到了人們的關(guān)注.在異種動物之中,由于豬器官的生理解剖特點(diǎn)及臟器大小與人類十分接近,被認(rèn)為是異種器官移植的理想供體,但豬→人異種器官移植需要克服的首要免疫學(xué)障礙是超

2、急性排斥反應(yīng).其發(fā)生的主要機(jī)理是人體內(nèi)預(yù)先存在的天然抗體識別豬細(xì)胞表面的異種抗原表位-半乳糖α1,3半乳糖(galactose α1,3 galsctose,Gal α 1,3 Gal),從而激活補(bǔ)體而引起血小板聚集,形成血栓,導(dǎo)致移植器官的失功. 水蘇糖是從一種叫做地靈(Stachys floridona)的根莖中提取的α半乳糖苷類非還原性低聚糖,簡單的結(jié)構(gòu)表示為:果糖-葡萄糖-半乳糖-半乳糖(Gal α1,6-Gal α1,6-Gl

3、u β 1,2-Fructose),分子式為C<,24>H<,42>O<,21>,分子量為666.59,無毒,易溶于水.水蘇糖具有α-Gal抗原相似的分子結(jié)構(gòu),理論上具有抑制超急性排斥反應(yīng)的作用.本實(shí)驗(yàn)旨在從細(xì)胞及器官水平,觀察水蘇糖對豬到人異種心臟移植超急性排斥反應(yīng)的抑制作用. [方法]: 首先,將傳代培養(yǎng)的豬髖動脈內(nèi)皮細(xì)胞PIEC暴露于人血漿中,同時與水蘇糖或PBS(空白對照)共同孵育后,采用MTT法檢測細(xì)胞的存活率

4、,從而觀察水蘇糖對PIEC的保護(hù)作用.為觀察對整體器官的效應(yīng),我們建立了離體豬心臟體外灌流的超急性排斥反應(yīng)模型,檢測人血液單獨(dú)灌注組及人血液加水蘇糖灌注組心臟組織的病理及其免疫組化(IgG及IgM在組織的沉積)的變化,以觀察水蘇糖對豬到人異種心臟移植超急性排斥反應(yīng)的抑制作用. [結(jié)果]: 1.MTT法檢測水蘇糖處理組的PIEC的相對存活率隨著水蘇糖濃度的增加而升高.說明水蘇糖對PIEC有保護(hù)作用. 2.成功地建立

5、了人血液體外灌注豬離,體心臟的超急性排斥反應(yīng)的模型. 3.灌注豬心臟的存活時間:水蘇糖加人血液灌注組的存活時間明顯長于人血液單獨(dú)灌注組.人血液單獨(dú)灌注豬心臟的平均存活時間為(9.5±2.5)min,而人血液加水蘇糖灌注豬心臟的平均存活時間為(46.8±8.1)min. 4.灌注豬心臟組織的病理學(xué)檢查:水蘇糖加人血液灌注組的豬心臟未發(fā)生超急性排斥反應(yīng);而人血液單獨(dú)灌注組豬的心臟的心肌間質(zhì)彌漫性出血、水腫,血管擴(kuò)張,內(nèi)皮細(xì)胞