可溶性Ⅰ型補(bǔ)體受體對(duì)異種心臟移植超急性排斥反應(yīng)作用的研究.pdf

1、目的:該課題通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)局部注射sCR<,1>重組腺病毒轉(zhuǎn)染部分心肌,使目的基因在心臟局部原位表達(dá),考察此種方法能否對(duì)HAR有一定的抑制作用,為今后深入研究sCR<,1>提供初步的依據(jù).目前尚無(wú)有關(guān)這方面的文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo).方法:1.豚鼠至SD大鼠頸部異位心臟移植模型的建立.選健康雄性豚鼠和SD大鼠為研究對(duì)象,體重分別為200±30g和250±30g,0.3﹪的戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,建立豚鼠至大鼠頸部異位心臟移植模型.2.Ad.lacZ、Ad

2、.GFP及Ad.sCR<,1>轉(zhuǎn)染豚鼠心肌及其蛋白表達(dá)的檢測(cè).選健康雄性豚鼠為研究對(duì)象,體重200±30g,0.3﹪的戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,左側(cè)開(kāi)胸顯露心臟,在左室壁注射SLRI、Ad.lacZ、Ad.GFP及Ad.sCR<,1>.40只豚鼠隨機(jī)分為4組進(jìn)行實(shí)驗(yàn).3.觀察Ad.lacZ、Ad.GFP及Ad.sCR<,1>蛋白表達(dá)高峰期.轉(zhuǎn)染后0.5、7、14、21及28天,在檢測(cè)組Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ中每組隨機(jī)取一只轉(zhuǎn)染動(dòng)物,于注射點(diǎn)處行心肌組

3、織切片鏡檢,每張切片隨機(jī)取10個(gè)200倍視野進(jìn)行陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù),計(jì)算每張切片10個(gè)視野內(nèi)轉(zhuǎn)染的陽(yáng)性心肌細(xì)胞平均數(shù),每組共計(jì)數(shù)均為50個(gè)視野.比較各組蛋白表達(dá)的高峰期.4.sCR<,1>對(duì)異種心臟移植超急性排斥反應(yīng)的抑制作用.選雄性健康豚鼠和SD大鼠為研究對(duì)象,體重分別為200±30g和250±30g.豚鼠及SD大鼠各90只,隨機(jī)配對(duì)后分3組用藥.結(jié)論:1.應(yīng)用改良Cuff技術(shù)建立的豚鼠至大鼠頸部異位心臟移植模型簡(jiǎn)便實(shí)用穩(wěn)定,重復(fù)性高.供心

4、存活時(shí)間明顯延長(zhǎng),說(shuō)明此模型可作為研究異種心臟移植超急性排斥反應(yīng)的一個(gè)較好的平臺(tái).2.sCR<,1>重組腺病毒能有效轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞,注藥后1-2周為表達(dá)高峰期,轉(zhuǎn)染后10天是進(jìn)行心臟移植的較好時(shí)期.3.改良Cuff技術(shù)建立的豚鼠至大鼠頸部心臟移植模型可以用于超急性排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.Ad.sCR<,1>轉(zhuǎn)染供體心肌后,能夠在局部抑制炎癥反應(yīng),供心存活時(shí)間有所延長(zhǎng).該實(shí)驗(yàn)證明,心臟局部范圍注射重組腺病毒轉(zhuǎn)染心肌,只是部分地延遲了HAR的發(fā)生