粘性放線菌在生物膜和浮游狀態(tài)合成胞外多糖的比較研究.pdf

1、四川大學(xué)碩士學(xué)位論文粘性放線菌在生物膜和浮游狀態(tài)合成胞外多糖的比較研究姓名：葛劍平申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：周學(xué)東20040430四川文學(xué)碩士學(xué)往論文粘性放線菌在生物膜和浮游狀態(tài)合成胞外多糖的比較研究碩士研究生：葛劍平導(dǎo)師：周學(xué)東中文摘要本研究觀察粘性放線菌形成的單菌種生物膜的結(jié)構(gòu)以及胞外多糖在生物膜中的分布，比較粘性放線菌在生物膜中和浮游狀態(tài)下合成水溶性胞外多糖和水不溶性胞外多糖量的差異，并探討產(chǎn)生差異的可能原因。

2、本實(shí)驗(yàn)主要采用微生物厭氧培養(yǎng)技術(shù)將粘性放線菌在玻璃片上形成單菌種生物膜，用熒光染料Fluorescein、BODIPY和Calcofluor進(jìn)行熒光染色，激光共聚焦掃描顯微鏡觀察其形成的生物膜結(jié)構(gòu)和其中胞外多糖的分布。并且將粘性放線菌分別進(jìn)行靜置培養(yǎng)和搖動(dòng)培養(yǎng)，以得到黏附狀態(tài)和浮游狀態(tài)下的粘性放線菌，蒽酮法測量兩種狀態(tài)下細(xì)菌合成的胞外多糖，比較它們在不同糖濃度底物和不同培養(yǎng)時(shí)間所合成胞外多糖的差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示玻璃表面粘性放線菌黏附形成

3、致密的生物膜，大量微菌落和溝壑間隙是其所形成生物膜的特征。臨近黏附表面的生物膜基底部位細(xì)菌密度較低，而中部則較致密。生物膜中胞外多糖分布與菌落中的細(xì)菌分布一致，結(jié)果提示粘性放線菌依靠其合成的胞外多糖聚集形成了生物膜。生物膜狀態(tài)下粘性放線菌合成水溶性胞外多糖的數(shù)量與浮游狀態(tài)的比較，隨著培養(yǎng)基中糖濃度的增加變化不大或減少。而生物膜中的粘性放線菌合成水不溶性胞外多糖的數(shù)量與浮游狀態(tài)的比較，在各種糖濃度以及不同培養(yǎng)時(shí)間條件下，生物膜中合成的水不