乳酸菌產(chǎn)胞外多糖的研究.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文乳酸菌產(chǎn)胞外多糖的研究姓名：顧笑梅申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：微生物指導(dǎo)教師：馬桂榮20030916摘要MRS液體培養(yǎng)基配方中的牛肉膏除去，改良成MRSC培養(yǎng)基作為下一步菌株發(fā)酵產(chǎn)多糖的培養(yǎng)基。另外，EnterococcusduransZ22:菌株在不含任何大分子物質(zhì)的合成培養(yǎng)基GA中產(chǎn)多糖的能力也進(jìn)一步證實(shí)了EnterococcusduransZ222具有分泌EPS的特性。培養(yǎng)溫度對Enterococcusdurans

2、Z222菌株產(chǎn)EPS的影響試驗(yàn)、培養(yǎng)基中不同種類的糖和不同濃度初始糖量對EPS產(chǎn)量的影響試驗(yàn)、發(fā)酵液中EPS產(chǎn)量隨時間的變化的試驗(yàn)結(jié)果說明，對于EnterococcusduransZ22，菌株而言，培養(yǎng)溫度在37C比25C更有利于EPS產(chǎn)量的增加不同種類的糖源對該菌株產(chǎn)EPS的量有顯著的影響，以葡萄糖作為碳源所測得的EPS的產(chǎn)量最高該菌株在含6%葡萄糖的培養(yǎng)基中產(chǎn)生的EPS量最高，但是與在含4%葡萄糖的培養(yǎng)基中EPS的產(chǎn)量相比較差別不明

3、顯，所以選擇含葡萄糖4%的培養(yǎng)基較為經(jīng)濟(jì):以葡萄糖為碳源在37C下培養(yǎng)，測得在27h左右發(fā)酵液中EPS出現(xiàn)最大值，50h后發(fā)酵液中的EPS含量達(dá)到穩(wěn)定值，所以將發(fā)酵時間定為27h.將EnterococcusduransZ22:菌株經(jīng)活化后接入MRSC液體培養(yǎng)基中，發(fā)酵液除菌體后經(jīng)減壓濃縮，除蛋白、脫色、乙醇沉淀、透析、冷凍干燥得粗品EPS.粗品EPS經(jīng)CM一纖維素柱用醋酸緩沖液和上限為1.0molL的NaCl醋酸緩沖液進(jìn)行梯度洗脫，分別