產(chǎn)酶溶桿菌OH11胞外多糖合成相關基因的克隆及其與生物膜形成的關系.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、利用質粒pSC137（含CmR的mariner轉座子）對OH11進行轉座誘變，成功構建了Lysobacter enzymogenes OH11的轉座子插入文庫。通過表型篩選，從5000個接合子中篩選到2個胞外多糖突變株OE1和048和1個脂多糖突變株OE3.在MM平板上，OE1和OE3菌落干燥，邊緣皺縮；048菌落粘性增加。利用任意PCR技術，快速鑒定了OE1、OE3和048中轉座子的插入位點。序列分析表明，在OE3中，轉座子插入到了A

2、BC(ATP-Binding Cassette)轉運系統(tǒng)的關鍵基因中，該基因編碼一個Permease蛋白。在048中，轉座子插入到TypeⅣ泌出系統(tǒng)的關鍵基因中，該基因編碼一個Pilin蛋白。在OE1中，轉座子插入的基因在公共數(shù)據(jù)庫中沒有同源基因，提示該基因可能是L．enzymogenes特有的胞外多糖合成相關基因。生物膜試驗表明，OE3能正常形成生物膜，而OE1和048形成生物膜的能力顯著降低，同野生型相比，OE1和048形成生物膜的

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