胰腺癌肝轉(zhuǎn)移相關(guān)分泌蛋白質(zhì)的蛋白組學(xué)初步研究.pdf

1、目的：比較具有相同遺傳背景、不同肝轉(zhuǎn)移潛能的人胰腺癌細(xì)胞株L3.6 pl和Colo-357的分泌蛋白質(zhì)譜的差異，篩選及鑒定與胰腺癌肝轉(zhuǎn)移相關(guān)的分泌蛋白質(zhì)，為闡明胰腺癌定向肝轉(zhuǎn)移機(jī)制、尋找胰腺癌肝轉(zhuǎn)移早期診斷、預(yù)后判斷及藥物治療新靶點(diǎn)提供理論依據(jù)。
　　 方法：應(yīng)用雙向電泳技術(shù)分離一對來自同一親本、具有不同肝轉(zhuǎn)移潛能的人胰腺癌細(xì)胞株L3.6 p1和Colo-357的分泌蛋白質(zhì)，圖像分析軟件篩選出兩者差異表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)，利用基質(zhì)輔助

2、激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)對部分差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行鑒定。利用Western blot印跡法檢測差異分泌蛋白質(zhì)組織蛋白酶D前體、表皮型脂肪酸結(jié)合蛋白在兩株細(xì)胞中的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：建立了L3.6 pl和Colo-357細(xì)胞分泌蛋白質(zhì)的雙向電泳圖譜，識別出差異表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)20個(gè)，質(zhì)譜鑒定出5個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)，其中組織蛋白酶D前體、表皮型脂肪酸結(jié)合蛋白在高肝轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞株L3.6 pl中的表達(dá)水平高于低肝轉(zhuǎn)移潛

3、能細(xì)胞株Colo-357，而視黃醛脫氫酶1、二磷酸核苷激酶B、膜連蛋白A1在L3.6 p1細(xì)胞株中的表達(dá)水平低于Colo-357細(xì)胞株。Western印跡法分析證實(shí)了組織蛋白酶D前體和表皮型脂肪酸結(jié)合蛋白在L3.6 pl和Colo-357細(xì)胞分泌蛋白質(zhì)中的差異表達(dá)水平與比較蛋白組學(xué)研究結(jié)果一致。
　　 結(jié)論：高、低不同肝轉(zhuǎn)移潛能的胰腺癌細(xì)胞株分泌蛋白質(zhì)的表達(dá)存在明顯差異，兩者間的差異蛋白可能與胰腺癌肝轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，胰腺癌肝侵襲轉(zhuǎn)