應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)篩選胰腺癌早期診斷血清標(biāo)記物.pdf

1、胰腺癌(pancreatic carcinoma,PC)是一種惡性程度極高、治療困難、預(yù)后差的消化道腫瘤,5年生存率僅1％-5%。早期診斷困難,現(xiàn)有的診斷標(biāo)記物:糖抗原19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)、糖鏈抗原50(CA50)等都普遍存在著特異性差、敏感性低、假陽性率高等缺陷,因此臨床上亟需尋找新的胰腺癌相關(guān)分子標(biāo)記物。本研究利用蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)相關(guān)技術(shù):雙向熒光差異凝膠電泳(Fluorescence2-D

2、 Difference Gel Electrophoresis,2D-DIGE)和基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)篩選并鑒定了胰腺癌患者、慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)患者、胰腺良性腫瘤(pancreatic benign tu

3、mor)患者以及健康對(duì)照組外周血清中差異表達(dá)蛋白,成功篩選出了胰腺癌早期診斷候選血清標(biāo)記物。
　　目的:
　　(1)檢測2D-DIGE聯(lián)合MALDF-TOF-MS技術(shù)篩選胰腺癌患者血清生物標(biāo)志物的重復(fù)性和穩(wěn)定性;
　　(2)利用比較蛋白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)胰腺癌患者血清和對(duì)照組血清進(jìn)行分析,尋找胰腺癌潛在的特異性候選標(biāo)記物,并且為胰腺癌的的發(fā)病機(jī)制和早期診斷提供理論依據(jù)和新思路。
　　方法:
　　(1)雙向差異凝膠

4、電泳(2D-DIGE)分離40例胰腺癌患者、10例慢性胰腺炎患者、10例良性腫瘤患者和40例健康體檢者外周血清蛋白質(zhì),篩選出胰腺癌差異表達(dá)蛋白點(diǎn);
　　(2)基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spe-ctrometry,MALDI-TOF-MS)技術(shù)對(duì)差異顯著的蛋白點(diǎn)進(jìn)行鑒定,篩選出與胰腺癌早期診斷相關(guān)的

5、差異表達(dá)蛋白。
　　結(jié)果:
　　成功鑒定出3個(gè)胰腺癌差異表達(dá)蛋白:補(bǔ)體3(complement component3,C3)、轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(Transthyretin,TTR)和載脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)。
　　結(jié)論:
　　(1)2D-DIGE聯(lián)合MALDF-TOF-MS技術(shù)篩選胰腺癌患者外周血清中的特異性生物標(biāo)志物的方法具有較好的重復(fù)性和穩(wěn)定性;
　　(2)炎癥介導(dǎo)因子C3