廣西山銀花提取物綠原酸抗炎作用及其分子機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究廣西山銀花紅腺忍冬提取物體內(nèi)抗炎效應(yīng)并進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)，同時(shí)探討提取物主要成分綠原酸體外抗炎作用及其分子機(jī)制，為廣西道地藥用植物的深入開發(fā)提供理論和技術(shù)支持，加速廣西中藥現(xiàn)代化的進(jìn)程。 方法：①醇提取回流紅腺忍冬干燥花蕾，采用D101大孔樹脂分離除雜，濃縮干燥后HPLC測綠原酸含量；②分別設(shè)立模型組、陽性藥對照組和高、中、低3個(gè)給藥劑量組，給藥劑量分別是20、15、10g·kg-1，灌胃給藥，觀察提取物對巴豆油混合物致

2、小鼠耳廓腫脹及對角叉菜膠致小鼠足趾腫脹的影響，并進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)；③收集、純化、培養(yǎng)大鼠腹腔巨噬細(xì)胞(PMφ)，隨機(jī)分為正常對照組、脂多糖(LPS)和鈣離子導(dǎo)入劑(A23187)刺激組、陽性對照組和綠原酸Ⅰ-Ⅲ組，綠原酸劑量分別是50，100，200mg·L-1。LPS和A23187刺激復(fù)制細(xì)胞炎癥模型，鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變；MTT比色法檢測綠原酸對細(xì)胞生長活性的影響；LPS長時(shí)間刺激PMφ，ELISA法檢測細(xì)胞上清液中腫瘤壞死因子(

3、TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)和前列腺素E2(PGE2)含量，用PGE2的含量表示COX-2的活性；A23187短時(shí)間刺激PMφ，放射免疫分析法測定培養(yǎng)上清液6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的含量，以此表示COX-1的活性。 結(jié)果：①HPLC測定提取物綠原酸含量為24.3％；②提取物高、中、低劑量對巴豆油混合物致鼠耳腫脹有明顯抑制作用，高劑量組與陽性對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；在角叉菜膠致足趾腫脹模型中，

4、中、高劑量組能顯著抑制腫脹度。最大給藥劑量內(nèi)小鼠未出現(xiàn)死亡；③LPS刺激后，鏡下觀察細(xì)胞多由圓形變?yōu)樗笮?；④綠原酸在31.25 mg·L-1至1000 mg·L-1范圍內(nèi)對細(xì)胞基本無抑制作用；⑤正常對照組細(xì)胞上清液TNF-α、IL-6及PGE2的表達(dá)少，給予LPS刺激后上述指標(biāo)大量表達(dá)，除綠原酸50 mg·L-1組TNF-α含量與LPS刺激組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其余各濃度組TNF-α、IL-6及PGE2含量與LPS刺激組比較有顯著性差異