蛋白質(zhì)指紋技術在喉癌中的實驗研究和聲門上喉癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對預后影響的臨床研究.pdf

1、第一部分.血清蛋白質(zhì)指紋圖譜技術在喉癌中的應用 研究背景：喉癌是頭頸部高發(fā)的惡性腫瘤，目前晚期喉癌的療效仍不理想，提高早期喉癌的診斷率，降低晚期喉癌的比例是提高喉癌總的生存率的重要有效的手段；頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響喉癌預后的非常重要的因素，cN0喉癌頸部處理意見不一，處理方式多樣，選擇性治療對有隱性轉(zhuǎn)移的小部分患者是有益的，但對無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的大部分患者是過度治療，增加手術并發(fā)癥，降低生活質(zhì)量，探索增加臨床隱性淋巴結(jié)檢出率的方法有重要

2、意義。蛋白質(zhì)組學是后基因組時代的重要內(nèi)容，它對我們認識腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有重要的價值。血清在臨床中有著非常廣泛的用途，探討血清中的蛋白質(zhì)組改變更有助于臨床應用。 目的：運用血清蛋白質(zhì)組學技術來研究喉癌病例與健康對照及喉癌不同的性質(zhì)(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、病理分化、病變部位、T分期等)間的蛋白質(zhì)表達譜的差異，以期對喉癌的診斷與治療有更進一步的認識。 方法：收集中山大學腫瘤防治中心2003年1月-2004年7月喉癌患者59例，另收集

3、2004年8月-2005年6月有頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的喉癌患者9例，共68例喉癌患者血清；選取健康對照41例的血清。用蛋白質(zhì)芯片技術對血清中的蛋白質(zhì)組進行檢測，探討喉癌病例與健康對照及喉癌不同的性質(zhì)(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、病理分化、病變部位、T分期等)間的蛋白質(zhì)表達譜的差異。 結(jié)果： ①喉癌患者與健康體檢者血清蛋白質(zhì)指紋譜的比較，P≤0.01的差異蛋白有15883Da，15147Da，39639Da，8931Da及9197Da,其中1

4、5883Da15147Da在喉癌中低表達，8931Da，9197Da，39639Da在喉癌中高表達。建立的分類樹模型可將樣本中89.39％的喉癌病例和93.55％的健康對照正確劃分，靈敏度為89.39％，特異度為90.32％，陽性預測值為90.77％。 ②有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移兩組血清蛋白質(zhì)指紋譜的比較，P≤0.01的差異蛋白有9192Da和8814Da，兩個差異蛋白質(zhì)均在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移喉癌病例中低表達。建立的分類樹模型可將樣本中86.9

5、6％的有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和95.35％的無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例正確劃分，診斷的靈敏度為86.96％，特異度為95.35％，陽性預測值為90.90％。 ③聲門上型喉癌有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移兩組血清蛋白質(zhì)指紋譜的比較，P≤0.05的差異蛋白有3196Da，7980Da，23442Da，三個差異峰在聲門上型喉癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中有表達增高趨勢。 ④高分化和中低分化鱗癌兩組血清蛋白質(zhì)指紋譜的比較，P≤0.01的差異蛋白峰有兩個：29011Da和28

6、143Da，均在中低分化組高表達。 ⑤不同病變部位兩組血清蛋白質(zhì)指紋譜的比較，未發(fā)現(xiàn)P≤0.01的差異峰。 ⑥不同T分期血清蛋白質(zhì)指紋譜的比較，未發(fā)現(xiàn)P≤0.01的差異峰。 結(jié)論： 1.SELDI系統(tǒng)能高效地檢測血清中的低豐度蛋白質(zhì)。 2.SELDI系統(tǒng)能有效地檢測喉癌與健康對照血清中的差異蛋白(15883Da，15147Da，39639Da，8931Da及9197Da)，對發(fā)現(xiàn)喉癌腫瘤特異標志物

7、有重要意義；建立的決策樹模型能有效的將喉癌、健康對照區(qū)別開來，有助于早期發(fā)現(xiàn)喉癌。 3.SELDI系統(tǒng)能有效地檢測有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移喉癌血清中的差異蛋白(9192Da和8814Da)，對發(fā)現(xiàn)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關的特異標志物有重要意義；建立的決策樹模型能有效的將喉癌有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移病例區(qū)別開來，有助于檢測隱性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，指導治療。 4.SELDI系統(tǒng)能有效地檢測不同病理分級血清中的差異蛋白(29011Da和28143Da)，可輔助病

8、理診斷和了解喉癌發(fā)病機制。 第二部分.聲門上型喉癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對預后的影響及cN0頸部治療的探討 第1章cN0聲門上型喉癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的影響因素及頸部治療的探討 目的：聲門上型喉癌的隱性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高，是此類喉癌診治的重點之一。 本文旨在探討聲門上型喉癌的隱性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關因素、預后及治療情況。 方法：回顧分析1992-1999年我科收治的cN0聲門上型喉癌104例，對其隱性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率、轉(zhuǎn)移淋

9、巴結(jié)的分布、影響隱性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的因素及頸部處理等進行研究。 結(jié)果：本組cN0聲門上型喉癌隱性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為23.08％(24/104)，其中T10％，T223.9％(11/46)，T330.77％(8/26)，T418.52％(5/17)。隱性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)主要位于病變側(cè)Ⅱ、Ⅲ區(qū)(22/24)。出現(xiàn)隱性轉(zhuǎn)移組預后差(log-rank=10.66，P=0.0011)。切緣陽性影響隱性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率(P=0.002，χ2=10.015)。

10、病理分化程度(P=0.175，χ2=3.3489)、T分期(P=0.44，χ2=2.701)、原發(fā)灶處理方式(P=0.296，χ2=1.093)等對隱性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率影響無統(tǒng)計學差異。頸部選擇性清掃能降低cN0聲門上型喉癌隱性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率(P=0.044，χ2=4.070). 結(jié)論：cN0聲門上型喉癌的隱性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移主要位于病變側(cè)Ⅱ、Ⅲ區(qū)；出現(xiàn)隱性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移影響預后；切緣陽性影響隱性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率；對T1N0頸部可觀察，T2-4N0