8-烷基小檗堿的合成及減肥作用研究.pdf

1、肥胖癥是一種由多種因素引起的慢性代謝性疾病，以體內(nèi)脂肪細(xì)胞的體積和細(xì)胞數(shù)增加以致于體質(zhì)指數(shù)異常增高，并在某些局部過多脂肪沉積為特點(diǎn)。隨著生活水平的不斷提高，飲食習(xí)慣及生活方式的改變，體內(nèi)脂肪的堆積，尤其是甘油三酯的積聚導(dǎo)致了肥胖。有資料顯示，肥胖與動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病、冠心病、高血脂、高血壓、脂肪肝等疾病息息相關(guān)。導(dǎo)致肥胖的因素很多，如:飲食、遺傳、缺乏運(yùn)動(dòng)、神經(jīng)因素等。尤其值得關(guān)注的是炎癥在一定程度上也促進(jìn)了脂肪的堆積，而腸道中微生物

2、代謝產(chǎn)生的內(nèi)毒素是引起機(jī)體炎癥的關(guān)鍵因素。臨床上主要依靠神經(jīng)抑制食欲和脂肪吸收兩種方式實(shí)現(xiàn)減肥，但是神經(jīng)抑制有嚴(yán)重的副作用而遭到禁用，所以亟待開發(fā)出一種毒性較小，減肥效果好的藥物。小檗堿是黃連的一種主要成分，具有抗菌，抗炎，降血糖，降血脂，減肥的作用。研究表明，小檗堿促進(jìn)3T3-L1人前脂肪細(xì)胞的增值，減少脂肪生成酶的表達(dá)，減少PPAR-γ的表達(dá)，誘導(dǎo)糖酵解，激活A(yù)MP激活的蛋白激酶，減少瘦素，升高脂聯(lián)素（脂肪細(xì)胞分泌的抗炎癥因子）的表

3、達(dá)，以IKKβ（核因子抑制蛋白）為作用靶點(diǎn)，減少TNF-α，IL-1β，IL-6的表達(dá)，并阻斷NF-κB，從而抑制炎癥因子的釋放，阻斷與LPS有協(xié)同作用的TLR4的表達(dá)，從而在一定程度上發(fā)揮減肥的作用。由于小檗堿自身結(jié)構(gòu)的性質(zhì)，其口服吸收較差，大多隨糞便排出。因此，本實(shí)驗(yàn)室在小檗堿C-8位上用不同長(zhǎng)度的烷基鏈進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，得到了6種與小檗堿同母核的衍生物。對(duì)8-烷基小檗堿的進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，其生物活性相較于小檗堿有一定的提高，如:抗菌、抗

4、炎。因此，在本實(shí)驗(yàn)研究中，主要探索8-烷基小檗堿對(duì)高脂模型金黃地鼠的減肥作用和潛在機(jī)制。
　　本研究的豐要內(nèi)容和結(jié)果:
　　(1)初步探索6種8-烷基小檗堿對(duì)高脂模型金黃地鼠的減肥作用，結(jié)果表明高脂高膽固醇飲食可以誘導(dǎo)體重，甘油三酯水平的增加。另外，高脂高膽固醇飼料提高了金黃地鼠血清中內(nèi)毒素的水平。用8-烷基小檗堿給藥治療時(shí)發(fā)現(xiàn)其存在潛在的降低甘油三酯及體重的作用，且8-十六烷基小檗堿對(duì)這種降低作用最為明顯。
　　(2

5、)在探索8-十六烷基小檗堿對(duì)高脂模型金黃地鼠的減肥作用的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，給藥12周后，8-十六烷基小檗堿表現(xiàn)出良好的降低體重的作用，并呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系。而相較于較高劑量的小檗堿，8-十六烷基小檗堿的降低體重的效果更好。另外，8-十六烷基小檗堿在控制肝重和附睪脂肪方面也有明顯的效果。
　　(3)在探索8-十六烷基小檗堿對(duì)高脂模型金黃地鼠的食欲抑制的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，與高脂模型組相比，8-十六烷基小檗堿對(duì)金黃地鼠的飼料量無明顯的影響，說明8-十

6、六烷基小檗堿無明顯的抑制食欲作用。
　　(4)用乳果糖/甘露醇法測(cè)定金黃地鼠的腸道通透性實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)高脂飼料喂食金黃地鼠后，金黃地鼠尿液中的乳果糖/甘露醇之比明顯上升，說明了高脂飼料能大大的加大金黃地鼠的腸道通透性。而用8-十六烷基小檗堿給藥治療后發(fā)現(xiàn)，其對(duì)于降低金黃地鼠尿液中的乳果糖/甘露醇之比有明顯的效果，且呈劑量依賴性關(guān)系。這說明了8-十六烷基小檗堿能夠有效地降低金黃地鼠腸道通透性。
　　(5)通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR，

7、ELISA法檢測(cè)關(guān)于內(nèi)毒素和脂肪酶代謝相關(guān)基因的mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)。結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，高脂模型組金黃地鼠的血清中LPS、LBP、TNF-α、IL-6、瘦素的水平均較高，而在肝臟中LPS信號(hào)識(shí)別和跨膜所需的CD14，TLR4的水平也較高。這說明了高脂高膽固醇飼料能夠促進(jìn)機(jī)體產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。與高脂模型組相比，8-十六烷基小檗堿對(duì)血清中LPS、LBP、TNF-α、IL-6、瘦素及肝臟中CD14、TLR4的mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)的有

8、下調(diào)的作用。8-十六烷基小檗堿對(duì)血清中脂聯(lián)素的表達(dá)有上調(diào)的作用，說明了8-十六烷基小檗堿有明顯的緩解炎癥的效果。另外8-十六烷基小檗堿對(duì)小腸中脂肪酶的表達(dá)無明顯差異。
　　總之，8-十六烷基小檗堿是一種潛在的較小檗堿的抗肥胖活性更好的藥物，其作用機(jī)制可能是通過改善體內(nèi)炎癥狀態(tài)以達(dá)到減輕體重的目的。而抑制炎癥主要通過了降低腸道通透性抑制內(nèi)毒素的吸收，抑制LBP-CD14/TLR4活性降低進(jìn)入血液后的內(nèi)毒素的傳輸、信號(hào)識(shí)別、跨膜，增加