2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分氫氣吸入對小鼠草酸鈣結(jié)晶腎損傷的保護作用
  目的:探討高濃度氫氣吸入對乙醛酸鹽誘導的草酸鈣結(jié)晶腎損傷的保護性作用。
  方法:通過腹腔注射乙醛酸鹽誘導草酸鈣結(jié)晶腎損傷模型,氫氧霧化器制備氫氧混合氣。把24只雄性C57BL/6小鼠(8周齡),隨機分為4組(每組6只)。A、單純氮氧混合氣組(NO group):給予氮氧混合氣(67%氮氣+33%氧氣)吸入加腹腔注射生理鹽水(20ml-1kg-1d)干預。B、單純氫氧混合

2、氣組(HO group):給予氫氧混合氣(67%氮氣+33%氧氣)吸入加腹腔注射生理鹽水(20ml-1kg-1d)干預。C、草酸鈣結(jié)晶組(CaOxgroup):給予氮氧混合氣(67%氮氣+33%氧氣)吸入加腹腔注射乙醛酸鹽(100mg-1kg-1d)干預。D、氫氣干預結(jié)晶組(HO+CaOx group):給予氫氧混合氣(67%氫氣+33%氧氣)吸入加腹腔注射乙醛酸鹽(100mg-1kg-1d)干預。兩種干預方式間隔時間為6小時。7天后留

3、取血清、尿液和腎臟組織進行檢測。通過測定血清腎臟損傷分子1(KIM-1)評價腎功能損傷情況,尿鈣尿肌酐比反映尿鈣排泄情況,腎臟組織鈣含量測定和腎臟Von Kossa染色檢測腎臟草酸鈣晶體沉積情況,腎臟組織丙二醛(MDA)、8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)、髓過氧化物酶(MPO)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、還原型谷胱甘肽(GSH)、過氧化氫酶(CAT)活力反映腎組織氧化狀態(tài)和抗氧化能力,免疫組化法檢測腎臟骨橋蛋白(OPN)、跨膜糖蛋白

4、(CD44)、單核細胞趨化因子1(MCP-1)和白細胞介素10(IL-10)評價炎癥反應情況,原位末端轉(zhuǎn)移酶標記技術(TUNEL)檢測腎小管上皮細胞凋亡情況。
  結(jié)果:(1)與NO組相比,HO組血清KIM-1水平無明顯差別,CaOx組KIM-1水平明顯升高;而與CaOx組相比,HO+CaOx組KIM-1表達量明顯降低。(2)與NO組相比,HO組尿鈣尿肌酐比值和尿磷尿肌酐比值無明顯差別,CaOx組尿鈣尿肌酐比值和尿磷尿肌酐比值明顯

5、升高;而與CaOx組相比,HO+CaOx組尿鈣尿肌酐比值和尿磷尿肌酐比值明顯降低。(3)腎臟Von Kossa染色顯示,NO組與HO組無明顯鈣鹽沉積,CaOx組與HO+CaOx組腎臟鈣鹽沉積較明顯,主要分布在皮髓質(zhì)交界處,與CaOx組相比,HO+CaOx組鈣鹽沉積面積明顯減少;與NO組相比,HO組腎臟組織鈣含量無明顯差別,CaOx組腎臟組織鈣含量明顯增多,與CaOx組相比,HO+CaOx組腎臟組織鈣含量明顯減少。(4)與NO組相比,HO

6、組腎組織MDA、8-OHdG含量和SOD、GSH、CAT活力無明顯差別,CaOx組腎組織MDA、8-OHdG含量明顯升高,SOD、GSH、CAT活力明顯降低;而與CaOx組相比,HO+CaOx組腎組織MDA、8-OHdG含量明顯降低,SOD、GSH、CAT活力明顯升高。而這四組的MPO含量并無明顯差別。(5)免疫組化結(jié)果顯示,與NO組相比,CaOx組OPN、CD44、MCP-1、IL-10表達量明顯增多,與CaOx組相比,HO+CaOx

7、組OPN、CD44、MCP-1表達量明顯減少,而IL-10表達量明顯增多。(6) NO組與HO組無明顯TUNEL陽性細胞,CaOx組凋亡細胞數(shù)明顯增多,凋亡指數(shù)為8.7%,HO+CaOx組陽性細胞數(shù)較CaOx組明顯減少,凋亡指數(shù)為3.1%。
  結(jié)論:高濃度氫氣吸入可以明顯的減輕小鼠草酸鈣結(jié)晶沉積造成的腎小管上皮損傷,減少尿鈣排泄和腎鈣含量,減少草酸鈣晶體在腎小管的沉積,可以明顯減輕氧化狀態(tài),提高抗氧化能力,減少炎癥反應,改善腎小

8、管上皮細胞的凋亡,從而對草酸鈣結(jié)晶腎損傷產(chǎn)生保護效應,并且無明顯的副效應,可能為一種理想的抗結(jié)石治療的手段。
  第二部分氫氣減輕小鼠草酸鈣結(jié)晶腎損傷的血清代謝組學研究
  目的:探討氫氣減輕小鼠草酸鈣結(jié)晶腎損傷的代謝產(chǎn)物變化。
  方法:18只雄性C57BL/6小鼠(8周齡),隨機分為3組(每組6只)。A、單純氮氧混合氣組(NO group):給予氮氧混合氣(67%氮氣+33%氧氣)吸入加腹腔注射生理鹽水(20ml-

9、1kg-1d)干預。B、草酸鈣結(jié)晶組(CaOx group):給予氮氧混合氣(67%氮氣+33%氧氣)吸入加腹腔注射乙醛酸鹽(100mg-1kg-1d)干預。C、氫氣干預結(jié)晶組(HO+CaOx group):給予氫氧混合氣(67%氫氣+33%氧氣)吸入加腹腔注射乙醛酸鹽(100mg-1kg-1d)干預。兩種干預方式間隔時間為6小時,7天后留取血清標本進行代謝組學檢測。利用超高壓液相色譜-四級桿-時間飛行串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC/Q-TOF-M

10、S)技術對各組血清進行代謝輪廓分析,各組數(shù)據(jù)采用偏最小二乘判別分析(PLS-DA)進行多維分析,篩選出小鼠草酸鈣結(jié)晶腎損傷的潛在標志物和氫氣的作用靶點,初步闡明其作用機制。
  結(jié)果:代謝輪廓分析發(fā)現(xiàn),NO組、CaOx組與HO+CaOx組的代謝輪廓能明顯區(qū)分。CaOx組與NO組相比,共有26種代謝產(chǎn)物有顯著差異,為小鼠草酸鈣結(jié)晶腎損傷的潛在標志物,而經(jīng)高濃度氫氣吸入干預后,HO+CaOx組與CaOx組相比,有20種代謝產(chǎn)物發(fā)生了顯

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