脾切除對門靜脈高壓大鼠種植性肝腫瘤的影響.pdf

1、研究背景和目的
　　 肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC，以下簡稱肝癌）是全球最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率在惡性腫瘤中占第五位，致死率居第三位。80-90％的肝癌由肝硬化發(fā)展而來。肝硬化仍然是目前為止引起門靜脈高壓最常見的病因。
　　 肝癌的治療方法有很多，包括肝切除、肝移植、肝動脈化療栓塞、射頻消融、放射治療、生物治療、中醫(yī)中藥治療以及綜合治療等。對于肝功能良好的單發(fā)肝癌，肝切除仍是治

2、療首選。曾有文獻(xiàn)報道合并有肝硬化的肝癌患者行肝切除術(shù)后3年及5年生存率分別為35-62％、17-50％。在我國85-90％的肝癌患者合并不同程度的肝硬化，其中約30％合并脾功能亢進(jìn)，肝癌合并脾功能亢進(jìn)傳統(tǒng)上視為手術(shù)禁忌證，但隨著外科手術(shù)水平的不斷提高以及圍手術(shù)期處理的日趨完備，這部分患者仍可行外科治療，其手術(shù)安全性較前大有提高。
　　 脾臟作為人體最大的外周淋巴器官，具有細(xì)胞免疫及體液免疫功能，在機(jī)體免疫反應(yīng)中發(fā)揮著重要抗炎、抗

3、腫瘤作用。正常脾臟切除后，可導(dǎo)致機(jī)體免疫功能下降，出現(xiàn)急性暴發(fā)性感染，甚至削弱人類的抗癌能力，特別是兒童。對肝癌伴肝硬化巨脾是否仍具有正常脾臟的免疫功能，尚無定論。對這類患者在行肝切除術(shù)時是否同時切除病理性脾臟，目前仍具較多爭議。近年來，我國有部分醫(yī)院開展了對肝癌合并肝硬化門靜脈高壓患者手術(shù)方式的研究。有關(guān)這方面的動物實(shí)驗(yàn)研究尚不多。
　　 本研究旨在通過在肝硬化門靜脈高壓的大鼠肝臟上種植腫瘤塊，觀察病理性脾臟的切除對肝腫瘤發(fā)展

4、的影響。
　　 方法
　　 1.皮下注射四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)大鼠形成肝硬化門靜脈高壓，在肝硬化門靜脈高壓誘導(dǎo)前后分別測定大鼠的血常規(guī)和肝功能指標(biāo)。在誘導(dǎo)過程中，隨機(jī)處死大鼠，分別肉眼及光鏡下觀察大鼠的肝臟及脾臟。
　　 2.將Walker256細(xì)胞注射在幼鼠皮下形成腫瘤塊，在門靜脈高壓大鼠肝臟的左外葉上種植腫瘤塊。隨機(jī)將大鼠等分為A、B兩組，A組大鼠在種植腫瘤塊同時切除脾臟，B組大鼠種植腫瘤塊并保留脾臟。

5、r>　　 3.在大鼠肝臟種植腫瘤塊10天后分別測定兩組大鼠的T細(xì)胞亞群CD4、CD8及 CD4/CD8。
　　 4.切除兩組大鼠的肝臟左外葉，測量種植腫瘤塊最大直徑（和）。
　　 5.大鼠肝臟左外葉上的腫瘤塊用免疫組織化學(xué)染色方法檢測腫瘤組織中Ki67的表達(dá)。
　　 6.計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，對于誘導(dǎo)肝硬化門靜脈高壓形成前后所測定的血常規(guī)及肝功能各項(xiàng)指標(biāo)以及A、B兩組大鼠的T細(xì)胞亞群CD4、CD8、CD4

6、/CD8、肝臟種植腫瘤塊最大直徑（和）、Ki67陽性率，均采用t檢驗(yàn)。P＜0.05認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS19.0軟件分析處理。
　　 結(jié)果
　　 1.根據(jù)注射CCl4后大鼠的一般情況、肝脾大體觀、肝脾鏡檢結(jié)果，以及注射CCl4前后大鼠血常規(guī)、肝功能各項(xiàng)指標(biāo)的變化，共有42只大鼠誘導(dǎo)形成肝硬化門靜脈高壓。
　　 2.Walker256細(xì)胞在幼鼠皮下及大鼠肝臟上生長良好。
　　 3.A組大鼠的

7、CD4值和CD4/CD8比值均高于B組大鼠（0.36±0.01 vs0.35±0.02，1.33±0.08 vs1.24±0.05; P＜0.05，P＜0.01），而CD8值則低于B組大鼠（0.27±0.01 vs0.29±0.02，P＜0.01）。
　　 4.A組大鼠的肝臟腫瘤塊最大直徑（和）與B組大鼠比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 5.A組大鼠肝臟腫瘤組織的Ki67陽性率為0.27±0.02，低于B組大鼠腫瘤組織的Ki