大皰性類天皰瘡皮損糖皮質(zhì)激素受體α和β表達(dá)的研究.pdf

1、目的：大皰性類天皰瘡(bullouspemphigoid，BP)多數(shù)患者的血清中存在抗基底膜帶成分的自身抗體，免疫電鏡顯示這種抗體結(jié)合在基底膜帶的透明板，因此本病為一種自身免疫病。研究發(fā)現(xiàn)BP循環(huán)抗體的靶抗原是位于半橋粒上的大皰性類天皰瘡抗原1(BPAG1，又稱BP230)和大皰性類天皰瘡抗原2(BPAG2，又稱BP180)?？乖贵w反應(yīng)形成的免疫復(fù)合物沉積在基底膜帶透明板部位，后者激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑，誘導(dǎo)多種炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，導(dǎo)致半橋粒結(jié)

2、構(gòu)破壞并形成表皮下水皰。糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid，GC)是下丘腦—垂體—腎上腺軸的關(guān)鍵分子，除具有重要的生理作用外，還具有很強(qiáng)的免疫抑制作用，臨床上被廣泛用于自身免疫性疾病的治療。GC是目前治療BP的首選藥物之一，GC的作用主要是通過與胞漿內(nèi)普遍存在的糖皮質(zhì)激素受體(glucocorticoidreceptor，GR)結(jié)合而發(fā)揮作用?，F(xiàn)在認(rèn)為，一方面GC在皮膚組織聚集，從而影響局部的炎癥過程，即阻止補(bǔ)體活化，影響中性粒細(xì)

3、胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞的招募，抑制蛋白水解酶及各種細(xì)胞因子的產(chǎn)生。另一方面是通過GC的免疫抑制作用抑制致病性抗體的產(chǎn)生。但不同患者對GC的療效不同，部分患者對GC治療不敏感，甚至對GC治療抵抗。GC抵抗病例的出現(xiàn)對臨床治療提出了嚴(yán)峻挑戰(zhàn)，但對其確切機(jī)制尚不十分清楚。目前國內(nèi)外尚未見有關(guān)BP患者對GC治療不敏感，甚至抵抗機(jī)制的研究。 為了解BP皮損中GR表達(dá)與激素治療反應(yīng)的關(guān)系，我們利用免疫組化方法檢測正常皮膚標(biāo)本、激素治療敏感

4、患者皮損及激素治療抵抗患者皮損中GR-α和GR-β的表達(dá)，從而探討其表達(dá)在GC治療抵抗中的作用及意義。 方法：選擇33例病理診斷為大皰性類天皰瘡患者皮損，根據(jù)既往病案調(diào)查分為激素治療敏感組、激素治療抵抗組，26例外科手術(shù)切取的健康皮膚作為正常對照。 所有皮損組織均為2000年1月至2005年6月河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院經(jīng)常規(guī)HE染色后病理診斷為BP，并經(jīng)免疫熒光檢查確診的存檔蠟塊，所有健康皮膚均為外科手術(shù)切取的多余皮膚，分別

5、取自軀干(18例)、四肢(8例)，福爾馬林固定后石蠟包埋備用。 用免疫組化SP法(鏈酶卵白素—過氧化物酶法)檢測BP患者包括激素治療敏感組、激素治療抵抗組皮損、正常對照組皮膚GR-α、GR-β的表達(dá)數(shù)量、強(qiáng)度和分布特點(diǎn)。 結(jié)果：1性別和年齡分布：在激素治療敏感組，男16例，女9例，年齡最大75歲，最小45歲，平均年齡66.76±15.36歲。激素治療抵抗組，男6例，女2例，年齡最大70歲，最小50歲，平均年齡66.25±

6、14.37歲。正常對照組中，男16例，女1O例，年齡最大70歲，最小555歲，平均年齡65.25±16.65歲。激素治療敏感組、激素治療抵抗組、正常對照組三組之間兩兩比較年齡差異無顯著性(P＞0.05)。 2GR表達(dá)部位：激素治療敏感組、激素治療抵抗組、正常對照組的表皮各層及間質(zhì)炎性細(xì)胞中GR陽性細(xì)胞分布不完全相同，在激素治療敏感組，GR-α主要在基底層及棘層下部表達(dá)，且陽性細(xì)胞數(shù)量也較多，在間質(zhì)炎性細(xì)胞中表達(dá)較少，GR-β主要

7、在基底層表達(dá)，基底層以上偶見陽性細(xì)胞，在間質(zhì)炎性細(xì)胞中表達(dá)亦較少；激素治療抵抗組中GR-α、GR-β主要在基底層表達(dá)，基底層以上偶見陽性細(xì)胞，GR-β在間質(zhì)炎性細(xì)胞中表達(dá)較多；正常對照組中GR-α、GR-β主要在基底層表達(dá)，基底層以上偶見陽性細(xì)胞。 3GR在表皮中表達(dá)強(qiáng)度：激素治療敏感組、激素治療抵抗組、正常對照組的表皮各層及炎性細(xì)胞中GR表達(dá)強(qiáng)度不完全相同，激素治療敏感組中GR-α呈強(qiáng)陽性表達(dá)的16例，陽性表達(dá)的9例，GR-β

8、呈強(qiáng)陽性表達(dá)的3例，陽性表達(dá)的11例，弱陽性表達(dá)的11例；激素治療抵抗組中GR-α呈強(qiáng)陽性表達(dá)的1例，陽性表達(dá)的2例，弱陽性表達(dá)的5例，GR-β呈強(qiáng)陽性表達(dá)的6例，陽性表達(dá)的2例；正常對照組中GR-α呈強(qiáng)陽性表達(dá)的4例，陽性表達(dá)的14例，弱陽性表達(dá)的8例，GR-β呈強(qiáng)陽性表達(dá)的3例，陽性表達(dá)的11例，弱陽性表達(dá)的12例。激素治療敏感組GR-α表達(dá)強(qiáng)度高于激素治療抵抗組和正常對照組(P＜0.05)，抵抗組和正常對照組之間無差異(P＞0.0

9、5)；激素治療抵抗組GR-β表達(dá)強(qiáng)度高于激素治療敏感組和正常對照組(P＜0.05)，敏感組和正常對照組之間無差異(P＞0.05)。 4GR在表皮中表達(dá)數(shù)量：激素治療敏感組、激素治療抵抗組、正常對照組的表皮各層及炎性細(xì)胞中GR表達(dá)數(shù)量不完全相同，GR-α陽性細(xì)胞比例在激素治療敏感組中的平均值為66.78±20.88％，在激素治療抵抗組的平均值為30.00±1.17％，在正常對照組的平均值為23.30±1.27％；GR-β陽性細(xì)胞比

10、例在激素治療敏感組中的平均值為28.37±3.02％，在激素治療抵抗組的平均值為41.52±1.57％，在正常對照組的平均值為21.70±1.38％。激素治療敏感組GR-α表達(dá)數(shù)量高于激素治療抵抗組和正常對照組(P＜0.05)，抵抗組和正常對照組之間無差異(P＞0.05)；激素治療抵抗組GR-β表達(dá)數(shù)量高于激素治療敏感組和正常對照組(P＜0.05)，敏感組和正常對照組之間無差異(P＞0.05)。 結(jié)論：1激素治療敏感組、激素治療

11、抵抗組、正常對照組的表皮各層及間質(zhì)炎性細(xì)胞中GR陽性細(xì)胞均有表達(dá)，證明表皮組織是GC的主要作用靶位。 2激素治療敏感組、激素治療抵抗組、正常對照組的表皮各層及間質(zhì)炎性細(xì)胞中GR表達(dá)強(qiáng)度及數(shù)量不完全相同。 3激素治療敏感組中GR-α表達(dá)高于激素治療抵抗組，表明GC的療效與GR-α的表達(dá)量呈正相關(guān)關(guān)系。 4激素治療抵抗組中GR-β表達(dá)高于激素治療敏感組，表明GC的療效與GR-β的表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。 5激素治

12、療的敏感性與年齡和性別無相關(guān)性。 以上結(jié)論說明，GR在皮損組織中表達(dá)的強(qiáng)弱及數(shù)量與是否產(chǎn)生GC治療抵抗密切相關(guān)，GR-α表達(dá)越強(qiáng)，含量越高，療效越敏感；GR-β表達(dá)越強(qiáng)，含量越高，療效越差。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)皮損組織中GR-α與GR-β含量與激素治療的反應(yīng)說明，激素直接作用于皮損部位是其治療有效的一個(gè)重要方面，該研究首次從皮膚組織學(xué)上說明，在調(diào)節(jié)激素治療的敏感性方面，靶器官內(nèi)GR-α與GR-β表達(dá)的相對量亦可能起重要的作用，故檢測BP患