SOCE通道在CAPRI膜轉位過程中作用的研究.pdf

1、CAPRI是GAPIP4BP家族的成員之一,具有針對小G蛋白Ras、Rap的特異性GAP(GTPase-Activating Protein)活性。CAPRI蛋白內含C2A、C2B、GRD、PH/Btk四個結構域,其中C2A-C2B結構域具有鈣離子結合能力,細胞質內鈣離子濃度上升時C2A-C2B結構域介導CAPRI的膜轉位;GRD為CAPRI功能結構域,具有RasGAP與RapGAP酶活性,可以使小G蛋白由GTP結合形式水解為GDP結合

2、形式,從而使小G蛋白失活?，F(xiàn)有的研究結果表明:當細胞在ATP、Histamine的刺激下,CAPRI從細胞質轉位至細胞膜,并激活CAPRI的RasGAP與RapGAP活性。但是在不同的細胞中,GFP-CAPRI的膜轉位存在差異,例如HeLa細胞膜中,GFP-CAPRI有較明顯的半衰期,而HEK293細胞膜上觀察不到這種現(xiàn)象。本研究旨在探討在HEK293細胞中毒胡蘿卜素(Tg)是否可以引起GFP-CAPRI的膜轉位以及GFP-CAPRI膜

3、轉位與SOC通道之間的關系。研究結果顯示,毒胡蘿卜素(Tg)刺激HEK293細胞時誘導的SOCE參與CAPRI的膜轉位。SOCE通道非特異阻滯劑2-APB,Gd3+以及使用sh-STIM1敲除內源性STIM1表達時,均明顯減弱Tg誘導的GFP-CAPRI膜轉位,STIM1持續(xù)活化突變體(constitutive active)STIM1D76A即使不用毒胡蘿卜素(Tg)刺激,亦可引起GFP-CAPRI膜轉位。同時,在原代星型膠質細胞中,