MCM2在小鼠子宮蛻膜化過(guò)程中作用的研究.pdf

1、胚胎植入和子宮的蛻膜化反應(yīng)是哺乳動(dòng)物妊娠過(guò)程中的兩個(gè)關(guān)鍵事件，很大程度上影響妊娠的成功率。胚胎植入是具有植入能力的囊胚與處于接受態(tài)的子宮之間進(jìn)行復(fù)雜信息交流的過(guò)程，可分為定位、粘附和侵入三個(gè)階段。胚胎粘附反應(yīng)發(fā)生后，子宮的基質(zhì)細(xì)胞經(jīng)過(guò)大量的增殖、分化、多核化過(guò)程形成蛻膜化細(xì)胞，這一過(guò)程稱(chēng)為子宮的蛻膜化反應(yīng)。蛻膜組織的重要作用之一是在胎盤(pán)形成前為胚胎發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)和母胎間免疫保護(hù)，而蛻膜細(xì)胞的逐漸退化又為胎兒的生長(zhǎng)提供了空間。子宮的蛻膜化異

2、常會(huì)導(dǎo)致胎盤(pán)缺陷、宮內(nèi)發(fā)育遲緩及早產(chǎn)等妊娠相關(guān)疾病，對(duì)妊娠結(jié)局有著重要的影響。子宮的蛻膜化過(guò)程主要涉及到基質(zhì)細(xì)胞的增殖，因此基質(zhì)細(xì)胞的增殖狀態(tài)會(huì)直接影響子宮的蛻膜化反應(yīng)。盡管先前的研究表明多種分子都參與子宮的蛻膜化進(jìn)程，但是我們對(duì)于蛻膜化過(guò)程中細(xì)胞增殖、分化的調(diào)控機(jī)制仍然知之甚少。
　　MCM2-7復(fù)合體在真核細(xì)胞DNA的復(fù)制啟動(dòng)過(guò)程中起著復(fù)制許可作用，確保每個(gè)細(xì)胞周期中DNA僅復(fù)制一次;而在DNA的復(fù)制延伸過(guò)程中起著解旋酶的作用

3、，解開(kāi)雙鏈DNA。MCM2作為該復(fù)合體的成員之一起著至關(guān)重要的作用。MCM2的表達(dá)與細(xì)胞增殖密切相關(guān)，在靜止期細(xì)胞中含量很少，在增殖細(xì)胞中含量很多。而MCM2的缺失可以抑制細(xì)胞的增殖，破壞染色體的穩(wěn)定性，引發(fā)DNA損傷，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。
　　鑒于MCM2對(duì)細(xì)胞增殖所起的重要作用，在本研究中我們首次探討了MCM2在小鼠子宮基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化過(guò)程中的作用機(jī)制。利用原位雜交等實(shí)驗(yàn)方法，我們發(fā)現(xiàn)Mcm2-7在小鼠的圍植入期子宮中呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)的時(shí)空表

4、達(dá)模式，隨著子宮基質(zhì)細(xì)胞的增殖其表達(dá)逐漸增強(qiáng)。為了研究MCM2在蛻膜化過(guò)程中的作用，我們利用小鼠基質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)誘導(dǎo)蛻膜化模型，通過(guò)RNAi技術(shù)特異性沉默Mcm2基因。我們發(fā)現(xiàn)Mcm2的沉默會(huì)導(dǎo)致子宮基質(zhì)細(xì)胞的增殖受到抑制，基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化反應(yīng)出現(xiàn)異常。此外，我們的研究還發(fā)現(xiàn)Mcm2基因的沉默會(huì)引起細(xì)胞周期的紊亂，細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子CyclinD3和CDK4的表達(dá)下降，具有蛻膜促進(jìn)作用的分子Wnt4的表達(dá)也下降，說(shuō)明MCM2在子宮蛻膜化過(guò)程