肝細胞癌復發(fā)歸巢機制的動物實驗觀察.pdf

1、該課題建立大鼠肝癌肝移植模型,觀察HCC復發(fā)的特點,并通過供受體性別差異,判斷移植肝內(nèi)復發(fā)的HCC起源于受體還是供體.在此基礎(chǔ)上嘗試提出一種有別于多中心和肝內(nèi)轉(zhuǎn)移的新機制.而這種機制可能在肝切除術(shù)后復發(fā)中亦存在.第一部分:大鼠肝癌肝移植模型的建立及術(shù)后肝癌復發(fā)的特點.該部分目的是建立穩(wěn)定的肝癌肝移植動物模型并觀察術(shù)后肝癌復發(fā)的生物學特點.130只雄性SD大鼠,100ppm二乙基亞硝胺飼喂誘癌.健康雌性SD大鼠作供體,共98只大鼠據(jù)Kam

2、ada袖套技術(shù)行原位肝移植.術(shù)后不給免疫抑制劑.術(shù)中根據(jù)腫瘤大小分三組:1組有明確肝癌結(jié)節(jié)但直徑<1.0cm(n=25),2組肝癌結(jié)節(jié)直徑1.0-1.5cm(n=41),3組肝癌結(jié)節(jié)直徑>1.5cm(n=32).不行肝移植術(shù)的10只大鼠作對照組.三組大鼠肝移植術(shù)中死亡率26.5﹪(26/98),術(shù)后30d累計死亡率71.5﹪(70/98).術(shù)后存活30d后計算平均生存期,1組81.3±33.2d,2組67.6±24.9d,3組54.4±

3、24.9d.對照組從誘癌開始150d后計算,平均生存期為29.4±12.9d.術(shù)后肝癌復發(fā)率35.7﹪(10/28),單純移植肝內(nèi)復發(fā)7.1﹪(2/28),肝和肺同時復發(fā)10.7﹪(3/28),肝和腹腔同時復發(fā)3.6﹪(1/28),單純腹腔腫瘤7.1﹪(2/28),單純肺部腫瘤7.1﹪(2/28).1,2,3組腫瘤復發(fā)率分別為12.0﹪,12.2﹪,12.5﹪,之間無明顯差異.肝內(nèi)復發(fā)率60.0﹪(6/10),病理發(fā)現(xiàn)3個復發(fā)的移植肝內(nèi)

4、共散在13個腫瘤,未見腹腔內(nèi)復發(fā)的肝癌直接侵犯移植肝.第二部分:移植肝內(nèi)復發(fā)肝細胞癌起源的研究.該部分旨在探尋移植肝內(nèi)肝細胞癌復發(fā)的細胞起源.6只受體大鼠移植肝內(nèi)出現(xiàn)肝癌復發(fā),3只因死亡時間過長標本棄用,另3個可用移植肝共13個腫瘤在大鼠存活時取下保存在-70.大鼠sry基因序列作模板,隨機引物法通過PCR制備能特異性與大鼠Y染色體結(jié)合的地高辛標記的DNA探針,原位雜交的方法檢測肝內(nèi)復發(fā)肝癌細胞核中的Y染色體.雄性大鼠正常肝組織和肝癌組