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文檔簡介
1、香辛料是日常膳食和加工食品中常用的呈香物質(zhì),所含的揮發(fā)油(EO)是一類抗菌性強(qiáng)、抗菌譜廣的天然抗菌劑,極具開發(fā)潛力。 以六種食源腐敗細(xì)菌和真菌為對象,對14種香辛料EO抗菌活性進(jìn)行了初步篩選,結(jié)果顯示,14種EO對六株測試菌都有一定的抑制作用,順序?yàn)椋憾∠恪⑷夤?、牛至、百里?大蒜、藿香>肉豆蔻、艾葉、干姜、荊芥、八角茴香、香茅、薄荷和魚腥草。14種香辛料濾液對細(xì)菌抑制效果不明顯,對真菌沒有抑制作用。 采用GC和GC/M
2、S測定四種EO的成分及其含量,鑒定出丁香油28個成份,主成分為丁香酚,含量78.11%,第一次發(fā)現(xiàn)丁香油中含有a-橙椒烯;肉桂油31個成份,主成分為肉桂醛,含量83.04%,胡椒烯、杜松-4,9-二烯和杜松-3,9-二烯這三個成分第一次發(fā)現(xiàn);牛至油26個成分,主成分為百里香酚和香芹酚,含量分別為37.13%和15.72%,香芹酚含量與報道有很大不同;百里香油27個成份,主成分為百里香酚,含量為30.74%,香芹酚含量與報道有明顯差別。
3、 首次采用醛基-亞硫酸氫鈉加成法和柱層析法對肉桂揮發(fā)油進(jìn)行分離純化,肉桂醛含量分別達(dá)99.01%和96.04%,得率分別達(dá)82%和71%。進(jìn)一步分析顯示,醛基.亞硫酸氫鈉加成法適合醛或甲基酮類含量較高的EO,層析法適應(yīng)范圍更廣。 比較目前幾種抗菌試驗(yàn)方法,發(fā)現(xiàn)肉湯稀釋.活菌計數(shù)法最為準(zhǔn)確?;诖朔椒ǎ晕宸N微生物為抗菌對象,測定了四種EO及其主成分抗菌活性:肉桂油、牛至油>丁香油>百里香油,百里香酚、香芹酚、肉桂醛>丁香酚
4、;丁香酚、肉桂醛、百里香酚和香芹酚為主要抗菌成分。 從靜態(tài)角度測定了四種EO成分的最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC),結(jié)果表明,對沙門氏菌的MIC和MBC:肉桂醛>百里香酚、香芹酚>丁香酚,對大腸桿菌的MIC和MBC:百里香酚、香芹酚>肉桂醛>丁香酚。從動態(tài)角度測定兩株菌的生長曲線和四個EO成分的時間-殺菌曲線,確定了四個EO成分對兩株菌的殺菌效果和殺菌時間,為抗菌試驗(yàn)的培養(yǎng)時間、電導(dǎo)率測定提供理論支持。 比
5、較目前幾種復(fù)配試驗(yàn)方法,發(fā)現(xiàn)棋盤法試驗(yàn)設(shè)計結(jié)合兩種結(jié)果判斷的方法最為準(zhǔn)確。基于此方法,研究了四種EO成分之間、四種EO成分與其它協(xié)同成分之間的關(guān)系,結(jié)果表明,四個EO成分兩兩之間對沙門氏菌,都具有協(xié)同抗菌的作用;對大腸桿菌,肉桂醛與百里香酚、肉桂醛與香芹酚組合是相加作用,肉桂醛與丁香酚、百里香酚與香芹酚、百里香酚與丁香酚、香芹酚與丁香酚組合是協(xié)同作用;對兩株試驗(yàn)菌,四個EO成分與:EDTA-二鈉或乙酸都有很強(qiáng)的協(xié)同作用,與Naa或檸檬酸
6、較強(qiáng)的協(xié)同作用,與乳酸沒有協(xié)同作用。單一成分對沙門氏菌的抗菌活性強(qiáng)于對大腸桿菌,但當(dāng)兩兩復(fù)配時,對大腸桿菌的抗菌效果明顯強(qiáng)于對沙門氏菌。另外,就大腸桿菌而言,協(xié)同性強(qiáng)弱:百里香酚>丁香酚>香芹酚>肉桂醛,協(xié)同貢獻(xiàn):丁香酚>百里香酚>香芹酚>肉桂醛。 以細(xì)胞膜電壓、膜滲透性和電導(dǎo)率等為靶點(diǎn),采用流式細(xì)胞儀等先進(jìn)儀器,在細(xì)胞水平上,對四種EO主成分的抗菌機(jī)理進(jìn)行了初步探索。結(jié)果表明:膜電位強(qiáng)弱:丁香酚>百里香酚、香芹酚>肉桂醛,膜滲
7、透性強(qiáng)弱:丁香酚>肉桂醛、百里香酚、香芹酚,電導(dǎo)率強(qiáng)弱:肉桂醛>百里香酚、香芹酚>丁香酚。綜合以上測定結(jié)果,可初步解釋為,這四個EO主成分能夠?qū)Υ竽c桿菌的細(xì)胞膜產(chǎn)生作用,降低了膜電位和質(zhì)子運(yùn)動力量,增強(qiáng)了膜的滲透性,導(dǎo)致胞內(nèi)離子外泄,從而抑制微生物生長,當(dāng)達(dá)到一定程度時,甚至能殺死微生物。采用熱力學(xué)、電化學(xué)和量子化學(xué)等理論,初步探索了EO成份的量效關(guān)系。在22個量化、物化和抗菌成分濃度參數(shù)中,影響沙門氏菌和大腸桿菌滅菌率最大的參數(shù)是抗菌
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