水稻紋枯病及稻瘟病拮抗菌的分離與抗性成分分析.pdf

1、水稻紋枯病和稻瘟病是對(duì)水稻危害最嚴(yán)重的病害，嚴(yán)重地制約了水稻的發(fā)展。目前防治這兩類病害的方法主要包括化學(xué)防治、抗性育種以及生物防治。過(guò)度使用化學(xué)農(nóng)藥會(huì)造成環(huán)境的污染，給人類和動(dòng)物帶來(lái)危害。生物防治與抗性育種相配合，展現(xiàn)出了防治病害的新前景。
　　 本研究分離獲得了一株對(duì)水稻紋枯病和稻瘟病均有很強(qiáng)抑制活性的菌株，命名為Osm-1。通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察、生理生化檢測(cè)以及16S rDNA序列的測(cè)定，鑒定菌株Osm-1為生理生化指標(biāo)特殊的短小

2、芽孢桿菌(Bacillus pumilus)。
　　 該菌株的無(wú)菌發(fā)酵液對(duì)紋枯病的抑菌率高達(dá)97.1％。對(duì)稻瘟的抑制率在50％以上。田間小區(qū)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)含菌發(fā)酵液對(duì)稻瘟病具有一定的防治效果，噴施后水稻稻瘟病感病率降低51.5個(gè)百分點(diǎn)。
　　 菌株Osm-1產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)經(jīng)過(guò)70％的丙酮處理后，上清液仍有活性。有較強(qiáng)的極性，易溶于水，不溶于正丁醇、乙酸乙酯以及氯仿。該物質(zhì)具有較好的熱穩(wěn)定性和酸穩(wěn)定性。100℃高溫處理10min

3、后仍有活性。酸處理不加熱，活性穩(wěn)定，加熱后活性喪失。堿處理無(wú)論加熱與否活性均喪失。經(jīng)過(guò)MCI大孔吸附樹(shù)脂以及高效液相色譜等分離純化方法獲得較純的單體物質(zhì)。采用LC-TOF/MS測(cè)定該物質(zhì)的分子量為454.1806，數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)未發(fā)現(xiàn)相似分子量的化合物。目前從芽孢桿菌屬次生代謝的抗菌物質(zhì)包括蛋白質(zhì)、酶、脂肽類以及多肽類，分子量均在1000以上，少數(shù)非肽類抗生素如amicoumacinA分子量為423，均與本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)的抗性成分不同，推測(cè)該物質(zhì)