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1、目的:以黃連解毒湯為例,半仿生提取法(SBE法)制備≤1000Da提取物為最終產(chǎn)物,探討中藥復(fù)方藥效物質(zhì)用SBE法研究的基本模式。
方法:①首先對(duì)黃連解毒湯進(jìn)行基源、性狀鑒定與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究;②采用均勻設(shè)計(jì)法,以鹽酸小檗堿、黃芩素、梔子苷、總生物堿、總黃酮、HPLC梯度洗脫總積分面積、≤1000Da提取物等7項(xiàng)指標(biāo),綜合評(píng)判,優(yōu)選SBE法制備≤1000Da提取物的提條件;③按“君、臣、佐、使”將方藥分為15種組合,以上述相同的指
2、標(biāo)和評(píng)判方法,優(yōu)選提取時(shí)藥材較佳組合方式;④在乙醇濃度30%-80%范圍內(nèi),采用比例分割法,以上述相同的指標(biāo)和評(píng)判方法,優(yōu)選方藥醇提制備≤1000Da提取物較佳濃度;⑤以相同的指標(biāo)和評(píng)判方法,作方藥3種方法(SBE法、WE法、AE法)≤1000Da提取物的多指標(biāo)成分比較;⑥綜合評(píng)判,確定該方藥成分提取較佳方法及工藝參數(shù)。
結(jié)果:①黃連解毒湯方中所用飲片皆符合《中國藥典》.2005版一部各有關(guān)項(xiàng)下規(guī)定;②SBE法制備該方藥≤10
3、00Da提取物的條件:3煎用水pH依次為6.0、7.5、8.5,提取時(shí)間依次為2h、1h、1h;③SBE法制備該方藥≤1000Da提取物,以黃連和梔子、黃芩和黃柏分別提取,再將兩種提取液合并為佳;④AE法制備該方藥≤1000Da提取物,乙醇濃度以60%為佳;⑤對(duì)該方藥3種方法(SBE法、WE法、AE法)制得的≤1000Da提取物作多指標(biāo)成分(鹽酸小檗堿、黃芩素、梔子苷、總生物堿、總黃酮、HPLC梯度洗脫總積分面積、≤1000Da提取物)
4、比較,結(jié)果以SBE法為優(yōu)。
結(jié)論:黃連解毒湯方藥成分提取以用SBE法,將黃連和梔子、黃芩和黃柏分別提取,再將兩種提取液合并,制得≤1000Da提取物為佳。對(duì)SBE法、AE法、WE法制得的3種≤1000Da提取物,作多指標(biāo)(鹽酸小檗堿、黃芩素、梔子苷、總生物堿、總黃酮、HPLC梯度洗脫總積分面積、≤1000Da提取物量)綜合評(píng)判比較,結(jié)果也以SBE為佳。本文建立的“以≤1000Da提取物為最終產(chǎn)物”SBE法成分研究模式,能體現(xiàn)中
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