鈦合金顆粒對(duì)體外培養(yǎng)人成骨細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究鈦合金顆粒對(duì)體外培養(yǎng)條件下的成骨細(xì)胞增殖、分化能力的作用以及骨保護(hù)素(OPG)基因表達(dá)的影響，探討人工關(guān)節(jié)假體松動(dòng)中磨損顆粒導(dǎo)致的骨溶解機(jī)制?！　》椒ǎ?、取人胚胎顱骨骨膜，采有用酶消化法和組織培養(yǎng)法獲取成骨細(xì)胞體外培養(yǎng)并傳代，觀察細(xì)胞形態(tài)，生物特點(diǎn)及成骨特性，并繪制生長(zhǎng)曲線同時(shí)堿性磷酸酶染色鑒定成骨細(xì)胞以及比較凍存前3-5代與凍存后成骨細(xì)胞的特點(diǎn)。2、電鏡下觀察鈦合金顆粒的形態(tài)并測(cè)量其粒徑，將不同濃度的鈦合金顆粒(1mg/

2、ml,0.1mg/ml，0.01mg/ml)與成骨細(xì)胞共同培養(yǎng)，分別于第2、4、6天用MTT法測(cè)量細(xì)胞增殖情況及4、7、10天用試劑盒檢測(cè)堿性磷酸酶活性。3、分別將不同濃度的鈦合金顆粒(1mg/ml,0.1mg/ml，0.01mg/ml)與成骨細(xì)胞基因培養(yǎng)3、6、9天用RT-PCR方法半定量測(cè)定骨保護(hù)素(OPG)基因mRNA的表達(dá)。并用統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析?！　〗Y(jié)果：1、培養(yǎng)的骨膜成骨細(xì)胞形態(tài)多為梭形和多角形與成纖維細(xì)胞相似，3

3、-5代成骨細(xì)胞生長(zhǎng)特點(diǎn)穩(wěn)定，具有成骨能力，凍存后成骨細(xì)胞生存率，增殖能力明顯受到影響。2、①鈦合金顆粒直徑90％小于3um，與體內(nèi)檢測(cè)到磨損顆粒大小基本一致。②10mg/ml組鈦合金顆粒抑制了成骨細(xì)胞的增殖(P＜0.05)。③不同濃度的鈦合金顆粒對(duì)成骨細(xì)胞堿性磷酸酶(ALP)的活性均有影響(P＜0.001)。3、不同濃度的鈦合金顆粒均抑制了成骨細(xì)胞骨保護(hù)素(OPG)基因表達(dá)，隨時(shí)間延長(zhǎng)，0.01mg/ml組對(duì)OPG基因作用逐漸降低。