辛伐他汀上調(diào)高脂飼養(yǎng)的ApoE--——小鼠膽固醇逆向轉(zhuǎn)運相關(guān)因子的表達.pdf

1、目的：
　　 辛伐他汀是人類治療高膽固醇血癥的一線藥物，其對膽固醇逆向轉(zhuǎn)運相關(guān)因子的表達調(diào)控尚未完全闡明。本實驗采用類似人家族性Ⅲ型高脂血癥的載脂蛋白E(apoE)基因敲除(ApoE-/-)小鼠作為動脈粥樣硬化(AS)模型，研究傳統(tǒng)他汀類藥物辛伐他汀對于高脂飼養(yǎng)的ApoE-/-小鼠高密度脂蛋白(HDL)及膽固醇逆向轉(zhuǎn)運相關(guān)因子表達的影響，探討辛伐他汀對膽固醇逆向轉(zhuǎn)運的調(diào)控作用及其機制。
　　 方法：
　　 C57

2、B/L6為基因背景的8周齡雄性apoE-/-小鼠20只，給予高脂飼料(15.8％脂肪+1.25％膽固醇)喂養(yǎng)，隨機分為模型組和辛伐他汀組(n=10)，另取5只同周齡雄性C57B/L6小鼠給予普通飼料喂養(yǎng)作為正常對照組。辛伐他汀組每日給予辛伐他汀(5 mg/kg)灌胃，正常對照組和模型組每日給予同等體積生理鹽水灌胃。6周后取血、收集腹腔巨噬細胞并留取肝組織樣本。用酶法檢測血漿總膽固醇(TC)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平；用ELI

3、SA法檢測血漿apoA-Ⅰ水平；通過檢測每小時每毫升血漿膽固醇酯化水平檢測卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(LCAT)活性；通過實時熒光定量PCR方法檢測腹腔巨噬細胞ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1(ABCA1)、ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G1(ABCG1)和B類Ⅰ型清道夫受體(SR-BI)mRNA表達，以及肝組織ABCA1、SR-BI、載脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)、載脂蛋白A-Ⅱ(apoA-Ⅱ)、ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體B4(ABCB4)、ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體B11(

4、ABCB11)、ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G5(ABCG5)和ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G8(ABCG8)mRNA表達變化；采用Western Blot方法檢測腹腔巨噬細胞ABCA1、ABCG1和SR-BI及肝組織ABCA1、ABCG1、SR-BI和apoA-Ⅰ在蛋白水平的表達變化。
　　 結(jié)果：
　　 與模型組相比，辛伐他汀治療后apoE-/-小鼠血漿HDL-C及其組成成分apoA-Ⅰ的水平明顯升高(p<0.01)。辛伐他汀上調(diào)apo

5、E-/-小鼠血漿卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(LCAT)活性(p<0.05)。參與膽固醇逆向轉(zhuǎn)運的幾個轉(zhuǎn)運子，包括巨噬細胞上的SR-BI(p<0.05)、肝組織的ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運子ABCG5(p<0.01)和ABCB4(p<0.01)mRNA水平都在辛伐他汀的治療下被誘導表達增加，參與HDL-C成熟過程的肝組織ABCA1(p<0.05)和apoA-Ⅰ(p<0.05)在辛伐他汀治療組的mRNA表達水平也明顯升高。另外，與模型組相比，巨噬細胞上的

6、SR-BI(p<0.05)、肝組織ABCA1(p<0.01)和apoA-Ⅰ(p<0.05)的蛋白水平在辛伐他汀治療組也明顯升高。
　　 結(jié)論：
　　 1.辛伐他汀可升高高脂血癥apoE-/-小鼠血液中HDL及其主要載脂蛋白apoA-Ⅰ水平，其機制可能與上調(diào)肝細胞對apoA-Ⅰ和ABCA1的表達有關(guān)；
　　 2.辛伐他汀可通過誘導外周巨噬細胞和肝細胞SR-BI、ABCA1、ABCG5和ABCB4等膽固醇逆向轉(zhuǎn)運相關(guān)