高脂高膽固醇飲食所致小鼠肺部炎癥中Api6的表達及其功能的研究.pdf

1、背景:近年來大量研究證實高脂飲食引起的脂代謝紊亂是許多器官損傷的重要原因。然而高脂特別是高膽固醇飲食在野生型的C57BL/6J小鼠肺部的影響少有報道，而且在此模型下細胞凋亡抑制因子6(Api6)對肺部炎癥的影響未見報道。
　　目的:研究高脂高膽固醇飲食是否可致野生型C57BL/6J小鼠的肺部的炎性反應(yīng)，以及在高脂高膽固醇飲食模型下凋亡抑制因子6的表達及其發(fā)揮的作用和可能的機制。
　　方法:6～8周齡的C57BL/6J雄性小鼠

2、喂養(yǎng)于SPF環(huán)境中，隨機分成兩組，分別給予普通飲食或高脂高膽固醇飲食喂養(yǎng)16周后取材實驗。采用免疫組織化學方法和人工計數(shù)肺泡灌洗液細胞檢測肺組織炎癥細胞浸潤情況。實時定量PCR和Western blot鑒定Api6和LXR-αmRNA與蛋白表達水平，流式細胞儀技術(shù)檢測小鼠支氣管肺泡灌洗液細胞凋亡情況。體外培養(yǎng)小鼠巨噬細胞RAW264.7檢測Api6對oxLDL引起細胞凋亡的影響。MTT法檢測重組Api6蛋白對小鼠巨噬細胞RAW264.7

3、增殖影響。
　　結(jié)果:高脂高膽固醇飲食喂養(yǎng)小鼠16周后，C57BL/6J小鼠肺組織出現(xiàn)明顯的巨噬細胞蓄積。與普通飲食組相比，高脂高膽固醇飲食喂養(yǎng)小鼠肺組織Api6基因和蛋白表達都顯著上調(diào)，同時支氣管肺泡灌洗液中的巨噬細胞凋亡水平明顯下降.體外實驗證實500ng/ml的重組rApi6處理RAW264.7巨噬細胞24h，可顯著抑制oxLDL引起的細胞凋亡。MTT實驗證實500ng/ml重組rApi6可以抑制由oxLDL引起巨噬細胞活性