同型半胱氨酸通過干擾膽固醇逆向轉(zhuǎn)運促進巨噬細胞泡沫化.pdf

1、目的：闡明不同濃度同型半胱氨酸對THP-1源性巨噬細胞泡沫化的影響；探討LXRα在同型半胱氨酸引起脂代謝紊亂中的作用。
　　方法：以THP-1單核細胞作為研究對象，培養(yǎng)THP-1單核細胞，取對數(shù)增殖期細胞進行后續(xù)試驗，先后與佛波酯（PMA）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）共同培養(yǎng)，成功復制試驗用泡沫細胞模型，然后分別加入0、50、100、200μmol/L的Hcy，各組細胞培養(yǎng)24小時，其中0組為對照組（不加入Hcy）。利用油紅

2、O染色（Oil Red O,ORO）檢測泡沫細胞內(nèi)中性脂滴蓄積情況。利用酶終點法定量測定細胞內(nèi)總膽固醇（Total Cholesterol,TC）、游離膽固醇（Free Cholesterol,FC）、膽固醇酯（Cholesterol Ester,CE）的含量，觀察不同濃度Hcy對泡沫細胞內(nèi)脂質(zhì)含量的影響。利用免疫細胞化學檢測泡沫細胞LXRα蛋白表達，利用實時定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應（Real Time-Polymerase Chain

3、 Reaction,RT-PCR）測定LXRαmRNA表達，觀察不同濃度hcy對泡沫細胞LXRα表達的影響。
　　結(jié)果：與對照組相比較，隨著Hcy濃度的增加，ORO染色結(jié)果顯示，Hcy呈劑量依賴性地促進了巨噬細胞內(nèi)膽固醇的聚集。實驗組（hcy50、100、200μmol/L）泡沫細胞計數(shù)陽性百分率均較對照組升高（P<0.05），其中以Hcy100μmol/L組升高明顯。在不同濃度Hcy干預下，泡沫細胞內(nèi)TC、FC及CE含量均高于對